【目的】筛选鉴定西瓜枯萎病菌的生防菌,减少化学农药的使用,推动西瓜产业的绿色发展。【方法】利用平板对峙法从西瓜根际土中分离、筛选拮抗菌,通过盆栽试验分析菌株的生物学特性及促生防病作用。【结果】筛选到1株对西瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.niveum,Fon-1)有显著拮抗作用的菌株K5。该菌株使西瓜枯萎病菌菌丝扭曲变形、粗大,且具有广谱性。盆栽试验表明K5对西瓜枯萎病菌相对防治效果78.95%,且具有明显的促生作用,表现为株高、叶片数、地上部干质量、地下部干质量、根长、地上部鲜质量及地下部鲜质量等显著增加。分子生物学分析表明K5为铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa),能产生嗜铁素、氢氰酸,具有固氮、解无机磷的能力,且有纤维素酶、几丁质酶和β-1-3葡聚糖酶的活性,携带氢氰酸、吩嗪-1-甲酰胺和硝吡咯菌素合成相关基因。【结论】铜绿假单胞菌K5对西瓜枯萎病有较好的防治效果,并能促进西瓜植株生长,极具开发为生防菌剂的潜力。