【目的】鉴定梨新品种的S基因型可为合理配置授粉树、杂交亲本选配提供理论依据。【方法】为鉴定23个梨新品种的S基因型,设计新的特异引物FTQQYQ-B和anti-GIIWPN,对梨新品种的基因组DNA进行S基因特异扩增,并对扩增片段进行回收、克隆、测序,对各序列进行同源性搜索比对,最终确定各品种的S基因型。同时,对S基因出现频率和各品种授粉亲和性进行分析。【结果】确定23个梨新品种S基因型为:红香酥S22S39;中梨1号S1S4;红酥宝、早红玉、红玛瑙、恬心和金香玉S3S39;丹霞红、中梨秋香和六月香S4S39;红酥蜜S4S22;中梨碧玉S5Sd;中梨蜜脆S4S5;中梨291S12S28;阳光蜜露S12S22;早白蜜、T109和红玉S5S12;红酥脆、满天红和美人酥S4S12;中梨金福S5S39;秋月S3S4;库尔勒香梨S22S28。统计发现S4和S39基因在新品种中出现频率最高。【结论】研究鉴定出23个梨新品种的S基因型,为新品种商业化栽培配置适宜授粉树提供了理论依据。