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农杆菌介导的厚皮甜瓜遗传转化体系的建立

发布日期:2024/3/22 11:04:08 浏览次数:
作者:唐伶俐,徐龙兰,徐永阳,贺玉花,田小琴,张 健,孔维虎,李文东,赵光伟
关键词:厚皮甜瓜;遗传转化;苗龄;侵染方式;抗性芽筛选
DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20230399
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【目的】遗传转化是进行基因功能验证的重要手段,构建较为完善、高效的厚皮甜瓜遗传转化体系,为基因功能验证和厚皮甜瓜种质改良提供技术支撑。【方法】以厚皮甜瓜B8为材料,用携带植物双元表达载体pQY002005的根癌农杆菌介导转化B8子叶诱导再生,通过探究影响甜瓜遗传转化过程中的重要因子的作用,建立以B8为基础的甜瓜遗传转化体系。【结果】以正常光周期培养3d的无菌苗子叶节为外植体,对其进行微刷+10s超声处理可提高农杆菌侵染效率,荧光芽获得率达29.6%;压力85kPa25min的抽真空侵染方式(间隔1min)侵染效果较佳;4mg·L-1Basta较适宜筛选抗性植株。利用以上方法,单次转化120个子叶节外植体,可获得31个再生荧光芽,17株生根苗,通PCR检测确定8株阳性苗,阳性率达58.8%,阳性植株获得率为6.7%【结论】成功建立了以B8为材料的甜瓜高效遗传转化体系,为甜瓜关键基因功能验证和种质精准改良提供技术支持。

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