- 作者:袁洪波，侯 珲，周增强，涂洪涛，王 丽
- 关键词:梨树腐烂病菌；突变体；致病力；侧翼序列
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20210067
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【目的】从梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库中筛选鉴定致病缺陷突变体，并分离致病相关基因。【方法】利用 农杆菌介导方法转化梨树腐烂病菌，获得504个T-DNA插入转化子，对其中250个转化子的致病力进行筛选。利用 TAIL-PCR对致病力显著降低的突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列进行扩增和分析。【结果】与野生型菌株相比，4 个转化子（T8、T12、T43和T75）在梨果实和枝条上致病力显著降低。扩增获得T8、T43和T75的T-DNA插入位点的特 异侧翼序列，测序后经Blast比对序列结果显示，转化子T8、T43和T75 T-DNA分别插在含MSF结构域的蛋白基因、 Zds1基因和假定的谷氨酸合成酶基因。【结论】构建了农杆菌介导的梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库，从中筛选获 得4个致病力缺陷的突变体，并分析了致病力缺陷突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列，为下一步梨树腐烂病菌致病 基因的克隆和功能研究奠定了基础。