【目的】明确云南7个澳洲坚果主栽品种果仁脂肪酸的组成差异，筛选富含特定脂肪酸的澳洲坚果品种。【方法】以云南7个澳洲坚果品种（A16、816、广11、HAES344、HAES660、桂热1号和昌宁1号）为试材，利用液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术检测单位鲜质量果仁脂肪酸组成和含量，用单因素方差分析（ANOVA）、主成分分析（PCA）和偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）进行综合分析评价。【结果】7个澳洲坚果品种的果仁均检测出41种脂肪酸，其中饱和脂肪酸（SFA）13种，单不饱和脂肪酸（MUFA）18种，多不饱和脂肪酸（PUFA）10种。脂肪酸含量方面，7个品种果仁的SFA含量范围为43 726.20~102 759.74 ng·g-1，MUFA含量范围为53 590.74~343 559.73 ng·g-1，PUFA含量范围为8 733.66~53 692.72 ng·g-1；其中广11的SFA、MUFA、PUFA含量均最高，其次是HAES660，桂热1号最低。进一步分析不同品种澳洲坚果果仁各类脂肪酸含量表明，广11的棕榈酸、棕榈油酸、油酸、异油酸和亚油酸含量显著高于其他品种，HAES660的硬脂酸显著高于其他品种，广11和HAES660的α-亚麻酸显著高于其他品种，桂热1号和HAES344的二十碳五烯酸（EPA）显著高于其他品种。通过PCA分析，广11和HAES660与其他品种明显分开；PLS-DA分析以VIP＞1.5筛选到癸酸、花生四烯酸和二十二碳六烯酸（DHA）为特征差异代谢物，癸酸和DHA含量最高的品种是816，花生四烯酸含量最高的是桂热1号。【结论】云南7个澳洲坚果品种均检测出41种脂肪酸，广11脂肪酸含量最高，其次是HAES660。棕榈酸、棕榈油酸、油酸、异油酸和亚油酸含量最高的品种是广11，硬脂酸和α-亚麻酸含量最高的是HAES660，癸酸和DHA含量最高的是816，花生四烯酸和EPA含量最高的是桂热1号。
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