PDF 【目的】明确拮抗真菌产红青霉SF-08（PenicilliumrubensSF-08）在核桃幼苗中的内生定殖特征及其动态变化。【方法】采用PEG介导的原生质体转化法构建GFP标记SF-08转化子；利用激光共聚焦显微镜观察其在核桃幼苗根、茎、叶中的分布；以野生型SF-08孢子悬液接种核桃幼苗，采用荧光定量PCR检测其在不同组织中的定殖密度变化。【结果】筛选获得1株表型和遗传性状稳定的GFP标记转化子SF08gfpF-2，其荧光信号稳定，菌落形态和拮抗活性与野生型无明显差异，该转化子较好地保持了野生型的主要生物学特性。该转化子可内生并系统定殖于核桃幼苗根、茎、叶，在根部主要分布于表皮、皮层和维管束，在叶部主要位于细胞间隙。建立的qPCR检测方法扩增效率高（＞98%）、线性关系良好（1.5×103~1.5×109copies·g-1DNA，R2＞0.99）。动态定量结果表明，SF-08先在根部大量定殖，后向茎、叶扩散，并在接种14~21d后菌体载量显著增加，随后趋于稳定或缓慢下降。【结论】SF-08具有在核桃幼苗体内内生和系统定殖的能力，根部为其主要定殖部位。