【目的】建立荔枝胚性愈伤组织悬浮培养及植株再生技术体系,为荔枝生物育种提供技术平台和参考。【方法】以荔枝花药愈伤组织为材料,分析不同浓度的肌醇、2,4-D、蔗糖、水解乳蛋白、椰汁以及起始接种量对荔枝胚性愈伤组织悬浮细胞建立的影响。【结果】培养基(MS+0.15g·L-1肌醇+1.0mg·L-12,4-D+20g·L-1蔗糖+50mL·L-1椰汁)有利于细胞分裂;最适起始接种量为30g·L-1,悬浮培养物淡黄色、易分散、细胞大小均一、形态一致;细胞团由6~15个细胞聚合而成,培养液清澈透亮;悬浮细胞生长参数呈S形,第3~6天是指数增长期,最适继代周期为6~8d;在一个生长周期内,培养液pH先升高后持续下降,而电导率持续下降,最终pH和电导率逐渐趋于稳定;经4次继代后(约20d),将悬浮培养物接种至固体培养基上进行增殖,用于诱导体胚分化;待体胚成熟后接种至萌发培养基,约50d可成功获得再生植株。【结论】建立了妃子笑荔枝花药胚性愈伤组织悬浮培养体系,可用于后续的细胞工程和诱变育种等研究。



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