PDF 摘要：【目的】建立小果甜柿（Diospyroskaki Thunb.‘XiaoguoTianshi’）叶片再生和优化其遗传转化体系，以期通过分子育种技术获得抗冻性强的砧木新种质。【方法】以小果甜柿叶盘为外植体，首先通过不同生长素（IAA）质量浓度和细胞分裂素（ZT，TDZ）配比探讨对其愈伤诱导和不定芽再生的影响；进而探讨其叶片对不同抗生素质量浓度组合的敏感性；此外，利用根癌农杆菌介导的叶盘稳定遗传转化体系，进一步探讨超表达君迁子（D.lotusL.）抗寒基因DlCBF1对小果甜柿叶盘再生植株抗冻性的影响。【结果】叶圆片在MS（1/2N）+ZT2.0mg·L-1+TDZ2.0mg·L-1培养基中愈伤形成率最高（64.71%）；将愈伤组织接种到MS（1/2N）+ZT2.0mg·L-1+IAA0.1mg·L-1生芽培养基中，不定芽再生率和不定芽数分别为31.11%和2.37个。头孢霉素质量浓度为400mg·L-1时可抑制农杆菌生长，且叶片愈伤形成率低（9.84%）；卡那霉素对叶片再生影响大，在质量浓度为20mg·L-1时其愈伤诱导率为11.57%。小果甜柿叶片稳定超表达君迁子DlCBF1基因，获得再生植株73株，其中阳性植株5株，荧光定量结果分析，阳性植株#1和#47中DlCBF1基因表达量分别为野生型的13倍和11倍。经过-4℃低温处理8h后，超表达株系与野生型株系相比，叶片受伤害程度更小，光合作用效率变化不明显，电导率低，H2O2和O2-在组织中的积累少，阳性株系表现出比野生型株系更强的抗冻性。【结论】在优化小果甜柿叶片外植体再生和稳定遗传转化体系的基础上，通过在小果甜柿叶片中超表达君迁子DlCBF1基因，获得6.85%转基因阳性再生植株，稳定超表达DlCBF1基因可显著增强小果甜柿再生植株的抗冻性。研究结果为培育抗冻性强的柿砧木新种质提供了科学依据。