- 作者:吕蕊,彭期定,杨婷,林宏辉,董家红,席德慧
- 关键词:猕猴桃病毒A;外壳蛋白;序列分析;原核表达;抗血清制备
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20190004
- 全文:
PDF () 摘要()
摘要:【目的】研究猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快 速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据。【方法】通过巢式 PCR 从四川省猕猴桃感病叶片中扩增 AcVA CP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用 Western blot检测效价。【结果】克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000。【结论】首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控 提供了技术支撑。