- 作者:焦楠，朱宁，程春振，林玉玲，李汉生，陈发兴，赖钟雄
- 关键词:西番莲；夜来香花叶病毒；黄瓜花叶病毒；病毒检测；双重RT-PCR技术
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20190012
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摘要：【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒（Telosma mosaic virus, TeMV）和黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白（coat protein, CP）基因序列，分别设计两对特 异性引物，并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示：TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L-1 和8.0 mmol·L-1；最佳退火温度为57 ℃；最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示，在 样品cDNA原液稀释到10-5 时，仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时，以健康组培苗作为对照组，应用建立的 双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测，发现有8份样品同时感染两种病 毒，8份样品仅感染TeMV，10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。