枣黑斑病菌细胞壁降解酶活性测定及致病性分析

摘要：【目的】以枣黑斑病菌产生的细胞壁降解酶为研究对象，明确其产生细胞壁降解酶种类和活性，探讨细胞壁降 解酶在病菌致病中的作用，为细胞壁降解酶参与病原菌侵染机理的研究提供理论依据。【方法】利用3，5-二硝基水杨酸 （DNS）法和考马斯亮蓝（Bradford）法，通过紫外-可见分光光度计测定反应混合物吸光度，根据酶反应所释放的还原糖 计算细胞壁降解酶活性。【结果】枣黑斑病菌在寄主体外不同碳源诱导下均能产生多聚半乳糖醛酸酶（Polygalacturonase, PG）、羧甲基纤维素酶（Carboxymethyl cellulase, Cx）、β-葡萄糖苷酶（β-glucosidase）、木聚糖酶（Xylanase）、聚甲基 半乳糖醛酸酶（Polymethylgalacturonase, PMG）和果胶甲基反式消除酶（Pectin methyltranseliminase, PMTE）等6种细胞 壁降解酶（Cell wall degrading enzyme，CWDE），但细胞壁降解酶活性存在一定差异，以骏枣果肉为外源诱导物，枣黑 斑病菌产生β-葡萄糖苷酶活性明显高于其他5种酶，说明β-葡萄糖苷酶在枣黑斑病菌致病过程中有着重要的作用，而 以滤纸为诱导物产生的β-葡萄糖苷酶活性高于其他诱导物，其活性高达10.104 U·mg^-1 。枣黑斑病菌侵染枣果后产生 的细胞壁降解酶种类及活性与体外不同碳源诱导的结果一致，可产生6种细胞壁降解酶，其中β-葡萄糖苷酶活性高于 其他5种酶，且病健交界处β-葡萄糖苷酶的活性明显高于受侵染后的发病部位和未被侵染的部位。【结论】枣黑斑病菌 在致病过程中起关键作用的细胞壁降解酶为β-葡萄糖苷酶，且在侵染过程中病健交界处的活性最高，而在寄主体外诱 导β-葡萄糖苷酶最佳碳源为滤纸诱导物。