龙眼胚性愈伤组织AGO10基因克隆及其表达分析

摘要：【目的】探究龙眼胚性愈伤组织Argonaute10(AGO10)基因的特性与龙眼生长发育、激素响应及非生物胁迫响 应之间的关系。【方法】根据龙眼胚性愈伤组织转录组数据库Unigene序列，采用RT-PCR结合RACE技术，以‘红核子’ 龙眼胚性愈伤组织 cDNA 为模板，进行龙眼胚性愈伤组织 DlAGO10 基因的克隆和生物信息学分析，同时利用 qRTPCR技术分析DlAGO10基因在龙眼体胚发生过程中、不同组织部位中、对不同激素的响应以及非生物胁迫响应的表达情况。【结果】获得龙眼DlAGO10基因的cDNA全长序列（GeneBank登录号为MH708535），全长共3 859 bp，其中包含 完整开放阅读框（ORF）3 003 bp，编码999个氨基酸。生物信息学分析表明，DlAGO10的保守结构域具有AGO的经典 结构域PiWi结构，与甜橙和克莱门柚AGO10蛋白同源性较高。qPCR分析结果表明，在龙眼体胚发生过程中，DlAGO10在龙眼非胚性愈伤组织时期和子叶胚时期的表达量较高，在‘红核子’龙眼合子胚S5阶段的相对表达量最高；不 同组织部位的表达情况为，DlAGO10在‘红核子’龙眼雌花中表达量最高，雄花次之，其他组织部位表达量均较低。植 物激素和非生物胁迫处理下的表达分析表明，一定浓度的2,4-D、KT和水杨酸（SA）均可诱导DlAGO10上调表达，而茉莉酸甲酯（MeJA）即可上调也可下调；盐、渗透、干旱和脱落酸（ABA）胁迫均可上调DlAGO10的表达。【结论】DlAGO10 可能参与龙眼体胚发生早期和晚期的转录调控过程，且可能参与生长素、细胞分裂素、SA和ABA的逆境胁迫信号转 导途径，调控龙眼多种非生物胁迫应答过程。