- 作者:白晓雪，秦红艳，韩先焱，杨义明，范书田，路文鹏，李昌禹
- 关键词:软枣猕猴桃‘；魁绿’；休眠芽；玻璃化法；超低温保存【目的】探讨软枣猕猴桃种质资源的长期保存技术体系。【方法】以软枣猕猴桃‘魁绿’休眠芽为试材，研究了预 培养液种类、预培养时间、装载时间、玻璃化保护液、
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20200102
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摘要：【目的】探讨软枣猕猴桃种质资源的长期保存技术体系。【方法】以软枣猕猴桃‘魁绿’休眠芽为试材，研究了预 培养液种类、预培养时间、装载时间、玻璃化保护液、恢复培养基等因素对玻璃化法超低温保存后休眠芽成活率的影响。【结果】休眠芽在0.3 mol·L-1 蔗糖 + 1 mol·L-1 甘油的预培养液中震荡培养2 d，常温下用装载液（2 mol·L-1 甘油 + 0.4 mol·L-1 蔗糖 + MS）处理 20 min，0 ℃条件下用 PVS（2 30%甘油 + 15%乙二醇 + 15%二甲基亚砜 + 0.4 mol·L-1 蔗糖 + MS）脱水120 min，换新鲜PVS2后迅速投入液氮中冻存24 h以上。取出后立即用38 ℃水浴解冻2 min，用含1.2 mol·L-1 蔗糖的MS卸载液洗涤30 min，无菌滤纸吸干后接种到MS + 2 mg·L-1 6-BA + 0.02 mg·L-1 NAA恢复培养基上，休眠芽 成活率达86.30%。用流式细胞仪鉴定再生植株倍性，没有发现明显变化。【结论】建立了高效的软枣猕猴桃‘魁绿’休 眠芽玻璃化超低温保存体系。