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苹果生长素响应因子(MdARF)基因克隆与表达分析

发布日期:2019/3/7 11:30:32 浏览次数:
作者:李慧峰,张文芹,董庆龙,王小非,冉昆
关键词:苹果; 生长素响应因子; 序列分析; 表达分析;
DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20180002
全文: PDF 摘要

摘要:【目的】克隆苹果 (Malus domestica ‘Zihong Fuji’) MdARF基因, 研究其在生长素和逆境处理下的表达特性。【方法】以‘紫弘富士’叶片c DNA为模板, 采用RT-PCR技术克隆得到10个MdARF基因;运用Array技术检测MdARF在不同组织中的表达特性;运用qRT-PCR技术检测MdARF在生长素、盐和甘露醇处理条件下的表达特性。【结果】克隆得到10个MdARF基因 (MdARF4-13, GenBank登录号为MG021615MG021624) , 其开放阅读框分别为2 136、3 345、2 052、2 400、2 532、2 691、1 782、2 532、3 342和2 034 bp。进化分析表明, MdARF3/7属于AtARF3/4-like, MdARF4/10属于AtARF10/16/17-like, MdARF1/6/11/13属于AtARF1/2-like, MdARF5/9/12属于AtARF5/7/19-like, MdARF2/8属于AtARF6/8-like。亚细胞定位预测分析表明, 10个MdARF蛋白均定位于细胞核。MR结构域氨基酸组成预测分析表明, MdARF2/5/8/9/12可能为转录激活子, MdARF1/3/4/6/7/10/11/13可能为转录抑制子。Array结果显示, MdARF在被检测的组织中均有表达。在IAA处理条件下, MdARF1/7/9/10转录水平受到诱导, MdARF2/3/4/6/8/11/12转录水平降低;在盐处理条件下, MdARF9转录水平受到诱导, 而MdARF1/5/7/10/12/13转录水平下调;在甘露醇处理条件下, MdARF6/9转录水平受到诱导。【结论】克隆得到10个MdARF基因, 其表达水平受IAA、盐或甘露醇诱导或者下调, 可能参与调控生长素信号转导以及逆境响应等过程。