- 作者:张潇玉 郭大龙 郭明晓 张国海 侯小改
- 关键词:葡萄; iPBS; 正交设计; 体系优化;
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.2014.03.011
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【目的】iPBS标记是一种新型、快速、高效的分子标记方法,试验筛选并优化了葡萄的iPBS-PCR反应体系,以建立葡萄种质资源评价和品种鉴定的可靠方法。【方法】采用L16(45)正交试验,对影响葡萄iPBS-PCR反应的模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物用量及退火温度等因素进行了优化,运用Bandscan和正交设计助手等软件对电泳结果条带进行统计分析。【结果】优化后的葡萄iPBS-PCR扩增的最佳反应条件为:DNA模板20 ng、Taq酶1.00 U、Mg2+2.40 mmol·L-1、引物0.50μmol·L-1、dNTPs 0.20 mmol·L-1,总体积20μL。退火温度53.8℃。【结论】建立了适合葡萄iPBS-PCR分析的优化反应体系,为葡萄种质遗传多样性的评价和鉴定提供了新的技术手段,为其他植物的相关研究也提供了参考。