毛桃种子表面根癌土壤杆菌的荧光定量PCR检测

【目的】明确不同来源毛桃种子携带根癌病菌情况,为切断病原菌的初侵染途径奠定基础。【方法】采用根癌土壤杆菌Agrobacterium tumefaciens的特异性引物virD2.For1/virD2.Rev1,建立了毛桃种子表面A.tumefaciens的real-time PCR检测方法,并利用该方法对不同来源毛桃种子的表面带菌量进行检测。【结果】实时荧光定量PCR法对毛桃种子表面根癌土壤杆菌数量的检测下限为1.60×102cfu·g-1,种子带菌量在1.60×102~1.45×107cfu·g-1范围内时,目的基因拷贝数与病原菌数量线性关系良好。对不同来源的毛桃种子进行表面带菌量检测结果表明,未接触土壤的毛桃种子表面病原菌含量低于检测下限,而接触地面土壤的毛桃种子表面带菌量的数量级达102cfu·g-1。沙藏可使带菌种子的表面带菌量升高2.7~5.0倍,而表面消毒可显著降低种子表面病原菌的含量。【结论】商品毛桃种子表面携带根癌病菌,病原菌来源于果园或其他地面土壤,桃种子表面带菌可能是桃根癌病的传播途径之一。