杧果细菌性角斑病菌粗毒素的生物 活性、理化特性及致病作用

摘要：【目的】探讨杧果细菌性角斑病菌粗毒素的生物活性、理化特性及其在致病过程中的作用，以期为明确该病菌的致病机制及病害防控提供有效依据。【方法】以‘台农一号’杧果叶片为试验材料，利用离体叶片针刮法对其粗毒素生物活性进行了研究，通过测定杧果叶片防御酶活性、可溶性蛋白含量、总糖含量和叶绿素含量的变化分析其对杧果的致病生理机制；同时以不同培养液、培养时间、培养温度及培养液pH为条件，对该菌产毒条件进行了优化。【结果】在Watanabe培养滤液中得到淡黄色粗毒素，是一类具有热稳定性的非蛋白类物质。毒素对杧果叶片有浸解作用，随着浓度的上升，对杧果叶片的损伤程度不断加重，形成的病斑与病原菌症状一致。生理生化研究发现粗毒素侵染杧果叶片后，能激活杧果体内过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶（CAT）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性。POD、PPO、CAT与PAL分别在接种病菌48、72、36 h后达到顶峰，酶活性分别是965.33、8 456、1 341.13和4.02×104 U·g^-1·min^-1，是健康叶片的1.35、2.20、1.08和4.19倍。可溶性蛋白含量、总糖含量随着处理时间的延长而显著升高，叶绿素含量呈现相反的变化趋势，随着处理时间的延长不断降低。毒素通过摇瓶震荡培养，优化出病菌的最佳产毒条件是：Wata⁃nabe培养液（pH 7~8），24 ℃培养120 h。【结论】因该粗毒素对杧果叶片产生明显的浸解作用，表明其能改变细胞膜的通透性，导致杧果叶片组织电解质的渗漏，对叶片细胞膜具有损伤作用，最终导致病害的发生。由此推断，毒素可能属于非寄主专化性毒素（NHST），同时可能是杧果细菌性角斑病菌的致病因子之一。