木瓜蛋白酶法与超滤膜法提取柿子多糖最佳条件的筛选

摘要：【目的】降低传统化学试剂提取而带来的毒性大风险，试用简便、温和、环保又高效的木瓜蛋白酶法、超滤膜法等分离纯化柿子总多糖提取物(TPsPF)。【方法】以当季成熟‘牛心柿’果实为试材，探讨了木瓜蛋白酶脱蛋白过程中不同处理工艺对TPsPF保留率和蛋白质去除率的影响，并进一步选择MWCO为200/10 ku的超滤膜截留收集分子质量10~200 ku的目标多糖组分，以超滤膜通量和TPsPF截留率为评价指标筛选出超滤工艺条件。【结果】TPsPF木瓜蛋白酶法脱蛋白优化工艺参数：酶用量1.0%，温度60℃，处理时间1.5 h，pH值6或7。其中对TPsPF保留率影响较大的因素是处理时间，而对蛋白质去除率影响较大的则是pH值。超滤膜富集分子质量10~200 ku的TPsPF的优化工艺条件：压力0.3 MPa，温度30 ℃，初始多糖浓度20 g·L^-1，最后得到TPsPF截留率为(45.82±2.37)%。【结论】试验中的脱蛋白酶法、超滤法等生物分离方法操作简便，温和并获得了较高的提取率，适合于TPsPF的分离提取，并为下一步药理作用的评价提供了物质基础。