刺葡萄ISSR 分子标记体系的 建立及种质资源聚类分析

摘要：【目的】建立刺葡萄（Vitis davidii Foëx.）的ISSR分子标记体系以及分析刺葡萄种质资源的亲缘关系，为刺葡萄的保护和利用提供依据。【方法】以8份外缘葡萄品种或类型为对照，52份刺葡萄类型为材料，采用改良CTAB法提取植物基因组DNA，以基因组DNA为模板，用同一试验考察多个因素及水平的筛选方式对ISSR-PCR扩增反应体系中的Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA的浓度及循环数进行优化，建立适用于刺葡萄的最佳ISSR-PCR反应体系；在优化的反应体系中进行多态性引物的筛选并进行分析，同时根据Jaccard 遗传相似系数进行UPGMA聚类分析。【结果】采取改良CTAB法提取的刺葡萄DNA质量优于常规的CTAB法，在优化的ISSR-PCR反应体系中，从100条ISSR引物筛选出了13个具有多态性的引物，共检测到139个位点，其中多态性位点116个，多态位点百分率为83.45%。聚类结果显示，对照组8份外缘资源均在刺葡萄种群外，刺葡萄与华东葡萄的遗传距离较腺枝葡萄近；52份刺葡萄类型分为三大组群，两大江西刺葡萄组群及湖南与福建刺葡萄组群，而在湖南与福建刺葡萄种群中又分为4个群组。【结论】刺葡萄种质资源具有丰富的遗传多样性，ISSR分子标记可有效揭示刺葡萄种质资源的遗传多样性和亲缘关系，对刺葡萄种质资源的保护和利用有重要的意义。