广州地区番石榴根结线虫鉴定与14-3-3基因的克隆

PDF阅读 日期：2017/7/13 9:11:34 浏览： 次
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【目的】摸清广州地区番石榴根结线虫的种类、分布及致病机制。【方法】观察番石榴根结线虫的雄虫、二龄幼虫、雌虫及其会阴花纹的形态学特征，根据根结线虫的通用引物#C2F3和#1108对线虫mtDNA的COⅡ和lrRNA基因间序列进行PCR扩增，获得750 bp的特异扩增产物，将扩增片段在GenBank上进行Blast比对。通过南方根结线虫与北方根结线虫的14-3-3序列设计简并引物，进一步扩增已鉴定的象耳豆根结线虫的14-3-3基因。【结果】广州地区番石榴根结线虫的形态与象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）相似；其扩增片段与象耳豆根结线虫（M. enterolobii）比对，序列相似性在99%以上。扩增了象耳豆根结线虫的14-3-3 基因，结果显示该基因的开放阅读框包含783 bp的片段，编码261个氨基酸，命名为Me-14-3-3。【结论】广州地区番石榴根结线虫为象耳豆根结线虫（M. enterolobii），14-3-3蛋白基因被成功克隆，扩增结果为进一步研究14-3-3蛋白基因在象耳豆根结线虫生长发育中的功能、摸清致病机制等方面奠定良好的基础。