组培条件下苹果实时定量PCR 内参基因的筛选

PDF阅读 日期：2017/5/27 16:31:38 浏览： 次
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【目的】筛选在组织培养条件下苹果苗中稳定表达的内参基因。【方法】应用实时荧光定量PCR技术，分析了18S rRNA，GAPDH，TUB，UBQ，ACT ，EF-1α 六个常用植物内参基因在苹果组培苗不同基因型、不同组织、不同继代时间的mRNA表达差异情况。供试的4个苹果基因型为‘长枝富士’‘短枝富士’‘红珍珠海棠’、砧木‘A8-11’；继代培养的不同组织为茎、叶、整株，生根培养的不同组织为根、茎、叶、整株；不同继代期间为10、20、30、40、50、60、70、80 d。【结果】经GeNorm软件对6个内参基因的表达稳定性进行评价，ACT 和EF-1α 在苹果组培苗的不同组织和不同继代时间的基因表达分析中较稳定，UBQ 和EF-1α 在苹果组培苗不同品种中表达均稳定。【结论】组培条件下，苹果基因表达相关研究的理想内参基因为ACT、UBQ 和EF-1α。