【目的】对VlCKX5基因进行克隆、生物信息学分析、表达特异性和转录调控分析，探究其在葡萄坐果中的调控作用。【方法】克隆VlCKX5基因及其启动子，对其进行生物信息学、表达特异性和转录调控分析。使用GUS组织化学染色法分析VlCKX5启动子的活性。使用PlantTFDB、CIS-BP和JASPAR数据库对VlCKX5的转录调控关系进行预测分析并筛选出关键转录因子。使用亚细胞定位、实时荧光定量（RT-qPCR）、酵母单杂交和双荧光素酶验证VlAGL6a对VlCKX5的调控作用。【结果】VlCKX5具有CKX家族典型特征的FAD结构域和细胞分裂素结合位点。VlCKX5在葡萄根和叶中高表达，其次是在花序中，CPPU处理后VlCKX5的表达量显著降低。VlCKX5响应CPPU激素的处理。VlAGL6a是VlCKX5的关键转录因子，定位于细胞核中。VlAGL6a在花序中高表达，在CPPU处理后的表达模式与VlCKX5的一致。VlAGL6a可以与VlCKX5相互作用，并促进其表达。【结论】葡萄VlCKX5基因响应CPPU的信号，转录因子VlAGL6a特异性结合VlCKX5基因的启动子并促进VlCKX5的转录，为进一步解析葡萄坐果机制提供理论基础。
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