【目的】建立发根农杆菌介导的盘克汉姆高效遗传转化体系。【方法】以盘克汉姆组培苗叶片、茎基部愈伤组织和叶片诱导的愈伤组织为试验材料,以发根农杆菌K599为转化菌株,结合RUBY报告基因,系统评估不同外植体的毛状根诱导率和毛状根阳性率。【结果】基于发根农杆菌K599介导的转化法,盘克汉姆组培苗叶片、叶片诱导的愈伤组织毛状根诱导率均可达86.36%以上,盘克汉姆茎基部愈伤毛状根诱导率为76.61%。其中,叶片外植体获得的红色毛状根比率最高,达95.66%;愈伤组织次之,为91.33%;组培苗茎基部愈伤组织(71.11%)最低。【结论】以盘克汉姆组培苗叶片、茎基部愈伤组织和叶片诱导愈伤组织为外植体,借助RUBY报告系统,建立了发根农杆菌介导的盘克汉姆高效遗传转化体系。本研究结果可为梨基因功能研究和新种质创制提供技术支撑。



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