【目的】开发桑树特异性分子标记,系统解析桑树种质资源的遗传多样性,为种质鉴定、亲缘关系分析和核心种质筛选提供依据,进而服务于桑树育种材料的高效利用与种质创新。【方法】以46份桑树种质为供试材料,基于桑树基因组重测序数据筛选设计Indel(insertion-deletion)引物,通过单因素和正交试验优化InDel-PCR反应体系,并进行遗传多样性分析。【结果】InDel-PCR最佳反应体系为:Buffer(含Mg2+)2.0µL,2.5mmol·L-1dNTP0.4μL,上、下游引物(10μmol·μL-1)各0.8μL,TaqDNA聚合酶(5U·μL-1)0.25μL,DNA(50ng·μL-1)1μL,ddH2O14.75μL。扩增程序为95℃预变性3min,94℃变性30s、58℃退火60s、72℃延伸60s,30个循环,72℃延伸10min,4℃保存。基于优化的InDel分子标记体系,对42份桑树种质开展遗传多样性检测及UPGMA(UnweightedPairGroupMethodwithArithmeticMean)聚类分析。供试种质间遗传分化显著,群体呈中等偏上遗传多样性水平;平均遗传距离为0.3729,期望杂合度(H)平均值达0.3507,香农信息指数(I)均值为0.5338。【结论】桑树材料分为六大类,揭示了桑树种质间复杂的关系。研究结果可为桑树分子标记数据库的完善、种质资源的鉴定和分子辅助选育提供了科学依据。



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