PDF 【目的】筛选调控红瓤核桃RW-1花青苷合成相关bZIPs转录因子，探究bZIPs转录因子调控花青苷合成关键基因JrUFGT5表达的分子机制，为RW-1的分子育种及品种改良提供理论依据。【方法】以RW-1和普通核桃中林1号不同发育期的种皮为材料，筛选获得2个显著差异表达的bZIP转录因子基因JrbZIP44和JrABI5。通过PCR扩增技术获得其基因序列，并对其基因序列和相应的蛋白理化性质进行分析；通过qRT-PCR确定其在种皮不同发育期的表达模式及对外源ABA处理的响应；通过瞬时转化烟草叶片确定其亚细胞定位；通过转化酵母菌株Y2HGold确定其转录激活活性；通过酵母单杂交（Y1H）和双荧光素酶检测试验验证bZIP转录因子对下游花青苷合成关键结构基因JrUFGT5启动子的调控作用。【结果】JrbZIP44在RW-1不同发育期的种皮中表达量均显著高于中林1号，而JrABI5则在RW-1种皮中始终低表达；外源ABA处理后，JrbZIP44和JrABI5均上调表达。与参考基因组相比，JrbZIP44和JrABI5核苷酸序列在RW-1中分别存在1个和4个碱基的差异，JrbZIP44基因CDS序列的391bp处（A-G），导致H（组氨酸）突变为R（精氨酸）；JrABI5基因CDS序列的111bp处（G-T）、322bp处（C-T）、660bp处（A-C）、分别导致A（丙氨酸）突变为S（丝氨酸）、P（脯氨酸）突变为L（亮氨酸）、T（苏氨酸）突变为P（脯氨酸），在908bp处（C-T）并没有导致蛋白序列的改变。系统进化树分析表明，JrbZIP44与烟草（Nicotianatabacum）NtbZIP44、番茄（Solanumlycopersicum）SlbZIP44亲缘关系较近，JrABI5蛋白与石榴（Punicagranatum）PgABI5、芒果（Mangiferaindica）MiABI5亲缘关系较近。JrbZIP44和JrABI5均定位于细胞核和细胞膜中，仅JrbZIP44具有转录激活活性。JrbZIP44能够促进JrUFGT5的表达，JrABI5能够抑制JrUFGT5的表达。【结论】bZIP转录因子JrbZIP44和JrABI5可能是参与调控RW-1种皮花青苷合成的关键转录因子。