无核品种中葡萄 18 号胚挽救技术体系的建立及其杂交后代早期选择

【目的】无核品种是葡萄的主要育种目标之一，通过建立无核品种中葡萄18号的胚挽救技术体系，为无核葡萄的胚挽救育种提供参考依据。【方法】通过研究不同胚珠取样时间（盛花后52、53、54、57、58、61和65d,DAF），培养基类型（NN和ER）及相态（固-液双相和固相），氨基酸（0，2.5mmol·L-1Ser、Cys、Gln），椰汁（0、100、200mL·L-1），GA3/KT/NAA组合及4种细胞分裂素TDZ（0和0.2mg·L-1）、6-BA（0和0.2mg·L-1）、KT（0、0.2和0.4mg·L-1）和ZT（0、0.2和0.4mg·L-1）对中葡萄18号胚发育率、胚萌发率或成苗率的影响，并利用无核基因SSR标记对胚挽救杂种苗进行无核性状早期鉴定，初步建立该品种的胚挽救技术体系。【结果】中葡萄18号在DAF61取样时胚发育率最高（34.33%）；基本培养基NN（29.33%）较ER（25%）的胚发育率更高，且固-液双相培养基的效果较固相更佳；添加2.5mmol·L-1Ser（40.74%）、Cys（43.33%）或Gln（44.21%）的胚发育率均高于对照（29.33%）；添加200mL·L-1椰汁的胚发育率（37.10%）显著高于对照（29.33%）。在3种激素GA3/KT/NAA组合中，发现仅添加GA3和KT时，成苗率最高（60%），而添加NAA的组合均出现异常分化现象，且成苗率较低。四种细胞分裂素TDZ、6-BA、KT和ZT中，添加0.2mg·L-1ZT更适合胚萌发及成苗，正常成苗的比率达76.36%。分别利用无核SSR标记P3_VvAGL11和5U_VviAGL11对中葡萄18号×玫瑰香的406个杂交株系进行无核性状检测，初步判定229个后代为无核株系，该组合的无核率为56.4%。【结论】中葡萄18号作为胚挽救母本的最佳取样时间为DAF61前后，可利用固-液双相培养基NN+2.5mmol·L-1Cys/Gln+5.5g·L-1琼脂+60g·L-1蔗糖+2g·L-1活性炭+0.5g·L-1水解酪蛋白进行胚珠离体培养，暗培养9~10周后，接种裸胚于WPM+0.2mg·L-1ZT+20g·L-1蔗糖+6g·L-1琼脂+1g·L-1活性炭进行胚萌发培养。鉴定出拥有无核基因SSR标记的胚挽救苗229株，是潜在的无核葡萄新种质。