荔枝愈伤组织继代及体胚发生过程中结构与多胺含量的变化

【目的】探究妃子笑荔枝愈伤组织继代及体胚发生过程中结构与多胺变化，为优化荔枝体胚发生技术体系提供理论依据与技术基础。【方法】采用石蜡切片技术、苏木精整体染色法、GC-MS法研究了胚性愈伤组织继代及体胚发生过程中的形态结构及多胺代谢变化。【结果】愈伤组织继代过程中，日增殖量前期增殖缓慢，后期快速增加，达到峰值后下降，最大日增殖量出现在继代后第15天。愈伤组织快速增殖阶段颗粒明显，细胞形态相对均匀，细胞质浓厚，染色深。在体胚发生培养基上约10d时愈伤组织出现明显的厚壁细胞形成生殖隔离，分化原胚，在原胚发生及子叶胚时期有大量淀粉积累。腐胺（Put）和精胺（Spm）是荔枝愈伤组织中多胺（PAs）的主要组分，亚精胺（Spd）含量较低。Put在愈伤组织中维持在较高水平，Put与Spd含量在愈伤组织胚性较强（继代第6天及体胚发生第10天）时都达到最高，体胚发生时愈伤组织中的Spm含量远低于继代时含量。多胺氧化酶（PAO）及二胺氧化酶（DAO）活性与Put及PAs含量呈正相关。【结论】愈伤组织继代约第15天时日增殖量最大，体胚发生过程中约在第10天分化体胚。高的PAO活性与PAs含量有利于荔枝体胚高频发生。