与质外体活性氧产生相关的酶基因在库尔勒香梨果实不同发育时期的表达特性

【目的】探讨库尔勒香梨（PyrussinkiangensisYü）果实不同发育时期石细胞的形成与质外体活性氧产生之间可能存在的关系，为调控库尔勒香梨果实石细胞含量、改善果实品质提供科学依据。【方法】以15年生库尔勒香梨为试材，利用显微镜观察果肉中石细胞发育特征，通过实时荧光定量PCR分析与活性氧产生相关的酶基因的相对表达量，探讨质外体活性氧在库尔勒香梨果实石细胞分化过程中的作用。【结果】库尔勒香梨石细胞染色结果表明，在果实发育过程中石细胞相对含量呈先上升后下降趋势，在花后10~30d呈上升趋势。该时期果实中石细胞处于初步分化和形成阶段，数量最多，相对分散，部分细胞没有或者不完全被染色，其中心部位染色面积慢慢加深；花后60d石细胞相对含量（单位面积）随着薄壁细胞的膨大迅速下降；花后80~100d石细胞相对含量趋于稳定。实时荧光定量PCR结果表明，与质外体活性氧产生相关的酶基因的表达趋势与石细胞的变化趋势大致相同，编码与质外体活性氧产生相关的呼吸暴发氧化酶同源物蛋白D（RBOHD）、超氧化物歧化酶（SOD）、具有草酸氧化酶活性的类萌发素蛋白（GLP）、脂氧合酶（LOX、LOX5）及多胺氧化酶（PAO1、PAO5-like）等酶基因也是在果实发育早期高表达。随着果实的发育，这些酶基因的表达量逐渐下降，并在花后80~100d其表达水平趋于较低水平且保持稳定。这些基因最高表达水平和最低表达水平之间的差异倍数在5~157倍之间。【结论】花后10~60d是库尔勒香梨果实石细胞形成的关键时期，该时期同样是与质外体活性氧产生相关的酶基因高水平表达时期，说明石细胞分化和质外体活性氧积累之间存在协同关系。