- 作者:余 洪，易 倩，张曼曼，朱世平，王福生，赵晓春
- 关键词:柚；枳；CclSAUR49基因；类柠檬苦素；启动子；顺式作用元件；超量表达
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20210126
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【目的】探究CclSAUR49基因对柑橘类柠檬苦素生物合成的影响。【方法】通过高效液相色谱（HPLC）检测叶片中的诺米林和柠檬苦素含量；利用实时荧光定量PCR分析基因的表达量。分别从柚和湖北早实枳中克隆CclSAUR49基因编码序列（codingsequence，CDS）及启动子，利用瞬时转化烟草对CclSAUR49蛋白进行表达定位；通过遗传转化湖北早实枳分析该基因的组织表达特性及其对类柠檬苦素生物合成的影响。【结果】类柠檬苦素含量和CclSAUR49表达水平在2个沙田柚品种间以及叶片的生长发育中均呈显著负相关。CclSUAR49蛋白定位于质膜和细胞核。从湖北早实枳中克隆得到的CclSAUR49基因的启动子序列中不含吲哚乙酸（IAA）响应元件。启动子活性分析发现，CclSAUR49基因主要在茎、根和老叶中表达，在嫩叶中没有表达。超量表达CclSAUR49导致类柠檬苦素含量显著降低，植株的叶片和节间显著伸长，茎增粗。【结论】柑橘CclSAUR49基因的表达有明显的组织特异性，对类柠檬苦素的合成或积累有抑制作用。