‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术研究

【目的】培育‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗木，初步建立‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系。【方法】采用MS为基本培养基，以植物生长调节剂6-BA、NAA和IBA为变量，接种后‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的生长状况为因变量；通过热处理结合茎尖培养技术，在32℃预热处理7d，再逐渐升温至37℃热处理30d后，剥取茎尖进行培养，待获得完整植株时，利用RT-PCR检测方法对‘阳光玫瑰’葡萄组培苗进行病毒检测。【结果】‘阳光玫瑰’葡萄嫩茎段外植体经75%乙醇30s+0.1%氯化汞8min处理，外植体的污染率和褐化率最低；经消毒灭菌的外植体接种到添加含有6-BA和NAA的MS培养基上诱导萌发，在1.5mg·L-16-BA和0.2mg·L-1NAA的培养基上萌芽率最高；将启动培养获得的无菌新芽，接种到含有6-BA和NAA的MS培养基中进行继代培养，在1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA的培养基中单芽增殖效果最明显；把继代培养中生长健壮的单芽切下，转入添加IBA和NAA的1/2MS培养基中进行生根培养，在添加0.4mg·L-1IBA和0.2mg·L-1NAA的1/2MS培养基上生根效果最佳；采用热处理结合茎尖培养进行‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的脱毒处理，热处理植株的成活率为78%，茎尖成活率为60%，经检测，再生植株不带葡萄卷叶病毒1（GLRaV-1）、葡萄卷叶病毒3（GLRaV-3）、葡萄病毒A（GVA）、葡萄斑点病毒（GFkV）、葡萄扇叶病毒（GFLV）。【结论】初步建立了‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系，为‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗的工厂化生产提供了技术支撑。