- 作者:王平勇，徐永阳，赵光伟，贺玉花，孔维虎，张 健，刘水苗，户克云，侯 冲，王兰菊，徐志红
- 关键词:西瓜；发根农杆菌；K599；过表达
- DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20190454
- 全文：
PDF （） 摘要（）
摘要：【目的】建立发根农杆菌介导的西瓜转基因不定根过表达体系。【方法】探索利用野生型发根农杆菌K599侵染 西瓜材料‘Sugar Baby’，诱导西瓜产生不定根的实验方法。借助该方法，将含有GUS基因和EGFP基因的过表达载体 pCAMBIA3301 和 pCAMBIA1300-ProSuper 导入发根农杆菌 K599，侵染西瓜材料‘Sugar Baby’，通过常规 PCR、qRTPCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测，评价该过表达体系的效果。【结果】利用野生型和导入外源质粒的发根农杆 菌均能成功诱导西瓜‘Sugar Baby’产生不定根。PCR检测结果显示，携带pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper 载体的发根农杆菌 K599诱导产生的不定根阳性率达到 100%。qRT-PCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测均能成 功检测到GUS基因和EGFP基因的过量表达。【结论】利用发根农杆菌K599诱导西瓜产生不定根介导基因过表达的方 法，具有周期短，操作方便，转化率高的特点，可实现基因功能的快速验证，为西瓜根系相关基因的功能研究提供技术 支持。