火龙果组培苗体细胞无性系变异及其分子检测

摘要：【目的】了解火龙果离体快繁体细胞无性系的遗传稳定性, 并揭示变异系间的遗传关系。【方法】以单粒种子萌发的丛芽扩繁第1代和第4代再生幼苗为材料, 分析繁殖系数及棱的形态变化, 并采用ISSR、SRAP和IRAP标记技术进行遗传变异分析。【结果】繁殖系数为14.9。快繁第4代试管苗中有3棱、4棱等6种形态学变异, 其中5棱丛芽最多 (50.54%) , 8棱丛芽最少 (1%左右) ;3棱和4棱丛芽在RNA水平上 (SRAP标记) 表现出差异。24条ISSR引物、11对SRAP引物和17条IRAP引物在70个样品中共产生405条带, 其中多态性带29条。扩繁第1代植株未发生DNA水平的变异, 第4代植株的DNA条带出现了增加或缺失现象,植株变异频率为24.2%。16株变异株与原始植株(种子萌发植株)的遗传相似系数为0.770.97。在相似系数为0.90时, 可将16个变异株分为4类, 其中第Ⅰ类包括原始植株和12个变异株, 第Ⅳ类与原始植株的差异最大,是GA3缺陷型矮化突变体。采用IRAP、SRAP、ISSR标记检测出的变异植株数量及多态性位点均存在差异。【结论】建立的火龙果快繁体系的繁殖系数为14.9, 随快繁次数的增加, 繁殖系数、生长势及遗传稳定性有下降的趋势。快繁第4代的体细胞无性系变异频率为24.2%, 主要表现在DNA水平和棱茎形态上的变化。获得的16个变异株与原始植株的遗传相似系数为0.770.97, 被分为4类, 第Ⅳ类是GA3缺陷型矮化突变体。3棱和4棱丛芽差异可能是基因差异表达的结果。新开发的IRAP标记是检测火龙果无性系变异的有效手段。