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西瓜抗根结线虫相关基因的克隆与表达分析

发布日期:2018/1/15 9:08:14 浏览次数:
作者:薛莹莹 邓云 刘君璞 徐小军 朱迎春 安国林 李卫华 孙德玺
关键词:野生西瓜; 根结线虫; 基因克隆; 表达分析;
DOI:10.13925/j.cnki.gsxb.20150199
全文: PDF 摘要

【目的】筛选西瓜(Citrullus lanatus)抗根结线虫相关基因,克隆其全长CDS序列,检测根结线虫接种后其在抗病材料和感病材料中的表达特征,分析其与西瓜根结线虫抗性的关系。【方法】以抗根结线虫的野生西瓜‘09005’和易感根结线虫的栽培西瓜‘ZDPI0006’为试材,用已知的植物抗线虫基因在葫芦科基因组数据库中比对,从结果中筛选到西瓜的相关基因Cla006580,与甜菜抗孢囊线虫基因Hs1pro-1同源性达到65%,命名为Cla Hs1pro-1。克隆Cla Hs1pro-1基因的CDS区序列并进行生物信息预测分析,在根结线虫接种处理和CK处理72 h内利用q RT-PCR技术检测不同抗性的西瓜根系中Cla Hs1pro-1的表达特征。【结果】从野生抗病西瓜‘09005’和栽培易感西瓜‘ZDPI0006’中均克隆得到Cla Hs1pro-1基因,CDS区序列全长1 434 bp,编码478个氨基酸,含有Hs1pro-1N和Hs1pro-1C两个蛋白保守结构域,抗、感材料之间存在4个SNP位点。RT-PCR分析显示‘09005’在接种根结线虫后Cla Hs1pro-1表达趋势呈先抑后扬,而在CK中呈先扬后抑,二者相反;‘ZDPI0006’在接种根结线虫后Cla Hs1pro-1表达趋势呈先上扬后抑制再上扬,与CK中表达趋势一致。【结论】西瓜Cla Hs1pro-1基因在抗病材料中表达特征与根结线虫接种密切相关,而在感病材料中与根结线虫接种无明显相关性,是西瓜抗根结线虫可能的候选基因。