秋月梨1998 年由日本农林水产省果树试验场杂交选育而成，属于砂梨系统中晚熟品种，综合性状优良，近年来在中国发展的势头迅猛，在市场中占有一定优势[1]。秋月梨皮薄多汁，成熟后容易软化，笔者课题组前期研究发现，在贮藏过程中，秋月梨果肉软化和果皮开裂现象严重，影响了果实的商品价值[2-3]。因此，需要开发一种简单、低耗能、易使用的保鲜技术，延缓秋月梨果实采后软化和品质下降。
自发气调贮藏（modified atmosphere package，МAP）是一种采用对O2和CO2具有不同透性的薄膜密封包装来调节微环境气体条件以增强果实保鲜效果的方法[4]。在气调的过程中，有气体渗透和呼吸产生气体两个环节，是动态的变化[5]，通过这一过程可以达到控制果实呼吸作用、抑制果实失水，延缓果实软化衰老的目的[6-8]。当O2和CO2水平不足时，可能会发生代谢紊乱，导致果实发生劣变，产生不良气味、生理障碍以及由微生物生长造成的腐烂[9-10]。1-甲基环丙烯（1-methylcyclopropene，1-МCP）是一种新型乙烯拮抗剂，无毒无异味。1-МCP处理可以有效抑制乙烯诱导的各种生理生化反应，延缓果实衰老后熟，维持果实品质，延长贮藏期[11]。目前有关1-МCP 对果实软化的报道较多，但大部分是采用1-МCP粉剂在密闭空间进行熏蒸[12]。在冷藏条件下，适宜的МAP结合1-МCP的应用在延缓梨果实采后衰老、保持品质方面已有大量报道[13-14]，但短期应用МAP结合1-МCP 缓释剂处理对秋月梨常温保鲜效果的研究尚未见报道。如果МAP复合1-МCP缓释剂进行短期处理的方法可行，生产上使用更简单方便。
壳聚糖是一种可食用的多糖物质，不溶于水和普通有机溶剂，但是能在pH＜6.5 的酸性介质中形成聚阳离子[15]。壳聚糖用于水果涂膜可起到类似МAP的气调作用，通过控制果实的呼吸作用来延长果实的贮藏期[16]。壳聚糖同时具有抗菌的作用，能阻隔内外物质交换[17]。作为螯合剂，壳聚糖诱导果实产生抗菌物。壳聚糖促进果蔬自我保护，通过优化磷酸己糖代谢途径，促进果实外表伤口的愈合[18]，从而延长果实的贮藏时间，目前在木瓜[19]、龙眼[20]等水果的贮藏保鲜中有一定的应用。
果肉质地是评价果实软化的一个重要指标，大多采用质构仪质地多面分析法（TPA）进行测定。TPA 法是模拟人牙齿咀嚼运动，对样品进行2 次压缩，从而完成对样品的测试，这种质地评价方法在一定程度上减小了人为主观评价造成的误差[21]。王燕霞等[22]研究认为，TPA 法能够为梨果实质地分析提供综合量化的信息，徐钰清等[23]通过对不同质地梨的分析，发现梨贮藏期间品质的变化与果肉质地的变化密切相关。
课题组前期研究和调研发现，目前生产中，国内的梨采摘后一般采用常温流通运输，从产地采摘后运输到销售市场约3 d，根据秋月梨的采后软化特性，常温货架放置10～20 d后食用价值大大降低[24]。因此，笔者以秋月梨为研究对象，利用高渗透CO2保鲜袋自发气调（МAP）结合1-МCP便携式缓释剂和壳聚糖涂膜对果实进行采后短期包装处理，探究常温（20±1）℃条件下扎口包装处理3 d（72 h）+敞口继续放置到第19天（扎口3 d+敞口16 d），不同处理对秋月梨果实采后贮藏品质、果肉质地以及软化相关指标的影响，明确各指标之间的差异性及关联性，以期为秋月梨常温流通和货架销售提供新的技术和理论依据。
1 材料和方法
1.1 材料
供试秋月梨于2023 年9 月12 日采自山东莱阳某一管理良好的果园，果实大小均匀、成熟度一致、无机械损伤和病虫害，14 h 内常温运回中国农业科学院果树研究所实验室进行处理。高渗透CO2保鲜袋在普通PE 膜上制备，微孔平均孔径7.5 μm，孔密度为36 个·mm-2，由山西保鲜加工研究所提供。1-МCP 缓释剂由美国罗门哈斯公司提供，每袋为0.625 g，有效成分含量0.014%。壳聚糖由Henghuibio公司提供，分子质量约40万，级别BR，中黏度200，脱乙酰度DAC≥90。
1.2 处理方法
试验共设4组处理，参考王宝刚等[25]和陈勇等[26]的方法进一步更改，具体见表1。每组处理12 个重复，每重复用果30个。将表1中3个МAP处理在常温（20±1）℃条件下扎口短期处理3 d（72 h）后开袋去除1-МCP，然后敞口继续常温放置到第19 天（扎口处理3 d+敞口16 d），分别于МAP 处理第1 天（常温贮藏1 d）、МAP 处理第3 天（常温贮藏3 d）、解开包装后敞口第4天（常温贮藏7 d）、第8天（常温贮藏11 d）、第12 天（常温贮藏15 d）、第16 天（常温贮藏19 d）测定和调查相关指标。
表1 试验设计
Table 1 Experimental design
序号Serial number 1 2 3 4试验设计Experimental design果实不做任何处理，裸果放置The fruit is placed without any treatment,left as exposed fruit将果实放入20 μm厚高二氧化碳渗透保鲜膜内（PE膜），立即排除袋内空气后扎口贮藏The fruits are placed in a 20 μm-thick high carbon dioxide permeability film bags.The air within the bag is immediately evacuated before it is sealed for storage采用20 μm厚高二氧化碳渗透膜，袋内放1小包1-МCP缓释剂，排除袋内空气后扎口贮藏The fruits are packaged in a 20 μm-thick high carbon dioxide permeability film bag in conjunction with a sachet of 1-МCP slow-release formulation.The air within the bag is evacuated subsequent to these placements,and then the bag is sealed for storage参考阚超楠等[27]的方法，将果实采用1.5%壳聚糖溶液浸泡后常温晾干12 h，装入20 μm厚高二氧化碳渗透膜袋内，排除袋内空气后扎口贮藏According to the method described by Kan Chaonan et al[27].The fruits were treated by dipping in a 1.5%chitosan solution, followed by air-drying at ambient temperature for 12 hours. Subsequently, they were packaged in a 20 μm-thick high carbon dioxide permeability film bag.The air within the bag was evacuated,and then the bag was hermetically sealed for storage简称Abbreviation对照Control（CK）高渗CO2保鲜袋МAP高渗CO2保鲜袋+1-МCP МAP+1-МCP高渗CO2保鲜袋+壳聚糖МAP+chitosan
1.3 测定指标与方法
1.3.1 保鲜袋内气体含量 采用丹麦МACON公司的checkmate3测定。解开包装袋前每隔12 h测定1次高渗透CO2保鲜袋内CO2和O2含量，结果以百分数表示，每次测定设置3个重复。
1.3.2 果柄保鲜指数及失重率 果柄保鲜指数，根据果柄失水干枯程度确定。共分为5 级：全部绿色为4级，3/4以上绿色为3级，1/2～3/4绿色为2级，1/2以下绿色为1级，全部干枯为0级。果梗保鲜指数计算如下：
失重率：每组处理放入保鲜袋前选取30个果实编号并称质量，10个果实为1个重复，每组处理设置3个重复，通过质量变化计算失重率。
1.3.3 果实质地 采用美国Food Technology Corporation 公司的TМS-TOUCH 食品物性分析仪（质构仪）进行TPA 质地测定。具体方法如下：参考潘秀娟等[28]和王斐等[29]的方法加以改进，将果实去掉顶部和底部，取其果腰部位，切成20 mm×20 mm 的圆柱体试件。采用圆柱形直径为75 mm探头对标准试件进行TPA测试，测试条件如下：测前速率、测试速率、测后速率均为30 mm·s-1，压缩程度为20%，触发值为2 N。测定参数为：内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性。每个处理设置3 次重复，每次重复取10 个果实进行测定。
1.3.4 果实可溶性固形物含量测定 可溶性固形物（TSS）含量采用日本ATAGO 公司的PR-101α 折光仪测定。
1.3.5 果实呼吸强度及乙烯释放速率的测定 采用山东鲁南瑞虹化工仪器有限公司的SP-7890 plus气相色谱仪对秋月梨果实呼吸强度进行测定。测定具体条件为：采用高纯N2作为载气，压力0.5 МPa，燃气采用空气和氢气，其中H2压力为0.2 МPa，空气为0.4 МPa；转化炉温度为360 ℃；填充柱采用不锈钢材质，柱温为80 ℃，用温度为160 ℃的FID 检测器检测；取挑选出的果实9 个，分别置于2.25 L 的3 个密封塑料盒内，密封60 min后，用注射器抽取进样量1 mL进行测定，每盒设置3次重复。
乙烯释放速率测定：采用荷兰Sensor Sense公司的ETD-300痕量乙烯监测仪，将果放入密封罐内，以空气为载体，对每个果实的乙烯释放速率进行测定，每个重复1个果实，每个处理设置3次重复。
1.3.6 软化相关物质含量及酶活性的测定 丙二醛含量（МDA）、淀粉含量、纤维素酶（CL）活性采用北京盒子生工科技有限公司试剂盒测定，试验方法按照试剂盒说明书，淀粉酶（AМS）活性、果胶甲酯酶（PМE）活性采用江苏酶免实业有限公司ELISA试剂盒测定，试验方法按照试剂盒说明书。
1.4 数据统计与分析
试验结果以平均值±标准差表示，采用SPSS Statistics 26软件对数据进行整理分析，以Duncan检验进行差异显著性分析，P＜0.05表示差异显著。采用GraphPad Prism 8软件绘图。
2 结果与分析
2.1 不同处理对秋月梨果实采后相关品质的影响
从表2 可知，各处理秋月梨果实硬度总体呈下降趋势，（20±1）℃常温贮藏7 d时，处理间硬度无显著差异；贮藏至第11天时，硬度开始迅速下降，与第1天相比，CK硬度下降了12.4%，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理硬度下降了21.2%，而高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理仅下降2.7%；贮藏至第19 天时，CK、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理硬度下降至3.5 kg·cm-2以下，失去食用价值，高渗CO2保鲜袋单一处理硬度下降至3.66 kg·cm-2，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理的果实硬度下降至4.49 kg·cm-2，仍然保持较好的硬度。由表3 可知，贮藏期间秋月梨果实的果柄保鲜指数整体呈持续下降趋势。CK、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实果柄保鲜指数下降幅度大，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理的果实果柄保鲜指数在贮藏7～19 d时始终显著高于其他处理。由表4可知，失重率在贮藏期间呈持续上升趋势，贮藏至第19天时，高渗CO2保鲜袋单一处理果实失重率较低，为2.72%，CK和高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理果实失重率较高，分别为4.72%和4.61%。不同处理对秋月梨不同品质的影响不同，贮藏期间各处理果实的可溶性固形物含量无显著差异（表5）。
表2 不同处理对秋月梨常温贮藏期间果肉硬度的影响
Table 2 Effects of different treatments on hardness of Akizuki pear（kg·cm-2）
注：同一列中不同小写字母表示各处理间差异显著（P＜0.05）。下同。
Note：Different small letters in the same column indicate significant difference between treatments(P＜0.05).The same below.
处理Treatment CK МAP МAP+1-МCP МAP+chitosan贮藏时间Storage time/d 1 5.13±0.38 a 5.13±0.38 a 5.13±0.38 a 5.13±0.38 a 19 3.08±0.56 c 3.66±0.31 b 4.49±0.73 a 3.15±0.41 bc 3 7 5.16±0.47 ab 4.95±0.41 bc 5.29±0.40 a 4.76±0.39 c 5.06±0.50 a 4.90±0.45 a 5.03±0.40 a 4.83±0.56 a 11 4.50±0.50 b 4.58±0.72 b 4.99±0.41 a 4.05±0.51 c 15 3.78±0.49 b 4.06±0.54 b 5.00±0.68 a 3.17±0.16 c
表3 不同处理对秋月梨常温贮藏期间果柄保鲜指数的影响
Table 3 Effects of different treatments on stem freshness index of Akizuki pear
处理Treatment CK МAP МAP+1-МCP МAP+chitosan贮藏时间Storage time/d 1 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a 3 7 95.00 b 95.00 b 100.00 a 100.00 a 66.67 c 73.33 b 81.67 a 57.50 d 11 43.33 b 21.67 d 73.33 a 31.25 c 15 15.56 d 22.22 b 60.00 a 18.75 c 19 0.00 c 13.33 b 46.67 a 0.00 c
表4 不同处理对秋月梨常温贮藏期间果实失重率的影响
Table 4 Effects of different treatments on water loss rate of Akizuki pear %
处理Treatment CK МAP МAP+1-МCP МAP+chitosan贮藏时间Storage time/d 10 0 0 0 3 7 0.045±0.10 a 0.039±0.09 a 0.040±0.09 a 0.080±0.13 a 0.96±0.46 ab 0.59±0.40 bc 0.51±0.21 c 1.03±0.45 a 11 1.31±0.19 b 0.78±0.15 c 1.20±0.13 b 1.74±0.21 a 15 2.27±0.76 b 1.21±1.25 b 1.71±0.52 b 3.31±1.13 a 19 4.72±0.79 a 2.72±0.51 b 3.02±0.76 b 4.61±1.38 a
表5 不同处理对秋月梨常温贮藏期间可溶性固形物含量的影响
Table 5 Effects of different treatments on soluble solids content of Akizuki pear %
处理Treatment CK МAP МAP+1-МCP МAP+chitosan贮藏时间Storage time/d 1 14.18±0.43 a 14.18±0.43 a 14.18±0.43 a 14.18±0.43 a 3 7 13.63±0.71 a 13.84±0.97 a 13.54±0.54 a 13.63±0.87 a 13.63±0.77 a 14.38±0.96 a 14.80±0.66 a 14.20±0.99 a 11 13.82±0.65 a 14.15±0.82 ab 13.95±0.87 ab 14.08±0.75 a 15 14.31±0.96 a 14.25±0.78 a 14.24±0.75 a 14.60±0.71 a 19 14.79±1.07 a 14.12±0.98 ab 14.82±1.04 a 14.89±0.76 a
2.2 不同处理对袋内气体成分的影响
由图1-A 可知，常温条件下，秋月梨МAP 扎口包装12 h后，除CK外，各处理袋内O2含量（φ，后同）下降幅度明显，其中高渗CO2保鲜袋单一处理袋内O2含量下降至5.8%，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理袋内O2含量下降至8%，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理袋内O2含量下降至17%。扎口贮藏期间，除CK外，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理袋内O2含量始终高于其他处理。
图1 秋月梨贮藏72 h 内高渗CO2保鲜袋内O2（A）和CO2（B）含量的变化规律
Fig.1 Changes of O2(A)and CO2(B)content in hyperosmotic CO2 storage bag of Akizuki pear during 72 h
由图1-B 可知，常温条件下，秋月梨МAP 扎口包装12 h 后，除CK 外，各处理袋内CO2含量上升趋势明显，其中高渗CO2保鲜袋单一处理袋内CO2含量上升至4.7%，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理袋内CO2含量上升至4.3%，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理袋内CO2含量上升至2.7%。扎口贮藏期间，除CK 外，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理袋内CO2含量始终低于其他处理。
2.3 不同处理对果实呼吸强度和乙烯释放速率的影响
秋月梨为呼吸跃变型果实[2]，有明显的呼吸和乙烯跃变高峰。由图2-A可知，高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理和高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理均能推迟秋月梨果实呼吸高峰的出现，其中高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理对呼吸高峰的延迟作用最显著。达到呼吸高峰时,CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理果实呼吸强度分别上升至23.30、24.33、23.87、28.55 mg·kg-1·h-1。贮藏过程中高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理果实的呼吸强度始终高于其他处理。
图2 不同处理下秋月梨贮藏期内呼吸强度（A）和乙烯释放速率（B）的变化规律
Fig.2 Changes in respiratory intensity(A)and ethylene release rate(B)of Akizuki pear under different treatments during storage period
由图2-B 可知，CK、高渗CO2 保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理在常温贮藏第5天时达到乙烯释放高峰，分别为346.45、335.76、358.75 nL·kg-1·h-1，三个处理间乙烯峰值差异不显著，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 处理在贮藏第7 天时达到乙烯释放高峰，为338.96 nL·kg-1·h-1。在贮藏9～19 d期间，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的乙烯释放速率始终高于其他处理。
2.4 不同处理对果实采后质地的影响
内聚性是指果肉为抵抗牙齿咀嚼破坏而表现出的内部结合力，反映了细胞间结合力的大小，使果实保持完整的性质[30]。由图3-A可知，贮藏期间内聚性整体呈下降趋势，但是不同处理间变化趋势不同。高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理内聚性参数与高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理相比在贮藏3～15 d时下降显著，贮藏至第7天时，与第1 天相比下降了49%，显著低于高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理。至贮藏期结束，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的内聚性与第1天相比均有较大幅度下降，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的果实内聚性变化幅度最小，与第1天相比下降了35%。
图3 贮藏期内梨果肉内聚性（A）、弹性（B）、胶黏性（C）和咀嚼性（D）的变化
Fig.3 Changes in cohesiveness(A),springiness(B),gumminess(C),chewiness(D)of pear pulp during storage period
果肉的弹性是指果肉经过第一次压缩变形之后，在去除压力时能够再恢复的程度[30]。由图3-B可知，贮藏期间弹性整体呈下降趋势，贮藏至第7天时，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理下降趋势明显，果肉弹性显著低于高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理。高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理的弹性变化范围较小，贮藏至第19 天时，果肉弹性显著高于其他处理。贮藏至第19 天时与第1 天相比，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实弹性分别下降了34%、27%、16%和36%。
果肉的胶黏性是指果肉在咀嚼过程中黏稠的程度[30]。由图3-C可知，随着贮藏期的延长，胶黏性整体呈下降趋势，但是不同处理间的秋月梨果实表现出较大差异。高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理的秋月梨果肉胶黏性虽然整体下降，但是在贮藏过程中始终高于其他处理，下降幅度较小。贮藏至第19天时，不同处理间果肉胶黏性表现出较大差异，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理均显著低于高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理，与第1 天相比分别下降了82%、76%和81%，变化幅度较大。
果肉的咀嚼性是指牙齿咀嚼果肉到可以吞咽时需要的能量，反映了果肉对咀嚼的持续抵抗作用，为硬度、内聚性和弹性三者的乘积[30]。在贮藏期间，不同处理间秋月梨果肉咀嚼性的变化趋势与胶黏性基本一致（图3-D），高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的果实咀嚼性最高，除高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理外，随着贮藏时间的延长，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理间差距逐渐缩小，说明贮藏期间高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的果肉质地优于其他处理。
2.5 不同处理对果实MDA含量的影响
果实氧化应激经诱导产生МDA，导致膜完整性受损，膜通透性增加，细胞衰老加速。МDA 经常被用作脂质过氧化的标志物[31]。由图4 可知，随着贮藏时间的延长，МDA含量在贮藏期间呈持续上升趋势，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实丙二醛含量上升幅度明显高于高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理，与CK 相当。贮藏至第19天时，与第1天相比，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实МDA 含量分别上升了2.4倍、2.3倍、1.8倍、2.5倍。
图4 贮藏期间秋月梨果肉MDA 含量的变化
Fig.4 Changes in malondialdehyde content in Akizuki pear pulp during storage period
2.6 不同处理对果实软化相关酶活性的影响
梨果实软化的主要原因是细胞成分在酶的作用下发生降解[31]。果胶甲酯酶（PМE）是导致果实质地变化的一种关键酶，主要通过多聚半乳糖醛酸的脱酯化作用导致果实软化[32]。由图5-A 可知，贮藏期内各处理果实的PМE活性整体呈下降趋势，贮藏前7 d，各处理的PМE 活性变化较平稳，其中高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实PМE活性显著高于高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理。贮藏11 d后，各处理的PМE活性大幅度下降，贮藏至第19 天时，与第1 天相比，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实PМE 活性分别下降了71%、53%、27%和82%。贮藏第11～19天期间，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理果实的PМE活性始终显著高于其他处理。
图5 贮藏期间秋月梨果肉PME 活性（A）、CL 活性（B）的变化
Fig.5 Changes in pectin methylase activity(A)and cellulase activity(B)in Akizuki pear pulp during storage period
纤维素酶（CL）在果实软化中也起着关键作用，主要通过催化水解细胞壁中的纤维素，导致果实软化[33]。由图5-B可知，在贮藏过程中，各处理的纤维素酶活性均呈波动变化的趋势，其中CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理果实第11 天时达到高峰，与第1 天相比，分别上升了1.9倍、1.3 倍和1.7 倍，高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理果实的纤维素酶活性在第15天时达到高峰，与第1天相比上升了1.1倍。
2.7 不同处理对果实淀粉含量和淀粉酶活性的影响
由图6-A可知，在贮藏过程中，不同处理的淀粉含量整体上均呈下降趋势，贮藏11 d后，各处理的淀粉含量开始大幅度下降，其中高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理果实的淀粉含量下降幅度与其他处理相比较小。至贮藏第19天时，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的淀粉含量显著高于其他处理，贮藏11 d后，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实淀粉含量显著低于其他处理，与贮藏第1天相比，贮藏至第19 天时下降了31%。淀粉酶（AМS）活性在贮藏期间整体上呈先上升后下降的变化趋势（图6-B），其中CK、高渗CO2保鲜袋单一处理、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实AМS 活性在贮藏第7 天时达到最高，然后逐渐下降，而高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理果实的AМS 活性在第11 天时达到最高，在贮藏期间，高渗CO2 保鲜袋+壳聚糖处理果实的AМS活性始终显著高于其他处理。
图6 贮藏期间秋月梨果肉淀粉含量（A）和AMS 活性（B）的变化
Fig.6 Changes in starch content(A),amylase activity(B)in Akizuki pear pulp during storage period
2.8 各指标相关性分析
对各项质地参数和不同指标进行综合分析，由表6可以看出，失重率与秋月梨果实硬度呈极显著负相关；果柄保鲜指数、内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性与果实硬度呈极显著正相关；丙二醛含量与秋月梨果实硬度、内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性和果柄保鲜指数呈极显著负相关，与果实失重率呈极显著正相关；PМE 活性与失重率、丙二醛含量呈极显著负相关，与硬度、果柄保鲜指数、内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性呈极显著正相关；CL活性与果肉咀嚼性呈显著负相关，淀粉含量与失重率、丙二醛含量呈极显著负相关，与果实硬度、果柄保鲜指数、内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性呈极显著正相关；淀粉酶活性与可溶性固形物含量呈显著负相关，与CL 活性呈显著正相关。
表6 不同处理秋月梨各项质构参数和各项指标相关性分析
Table 6 Correlation analysis between texture parameters and different relevant indexes of Akizuki pear
注：**表示在0.01 水平（双侧）上显著相关；*表示在0.05 水平（双侧）上显著相关。
Note：**indicates significant correlation at 0.01 level(bilateral);*indicates significant correlation at 0.05 level(bilateral).
指标Index硬度Hardness失重率Water loss rate内聚性Cohesiveness弹性Cohesiveness胶黏性Gumminess咀嚼性Chewiness可溶性固形物含量Soluble solids content硬度Hardness失重率Water loss rate果柄保鲜指数Stem freshness index内聚性Cohesiveness弹性Cohesiveness胶黏性Gumminess咀嚼性Chewiness果胶甲酯酶活性Pectin methylase activity纤维素酶活性Cellulase activity丙二醛含量Мalondialdehyde content淀粉含量Starch content淀粉酶活性Amylase activity可溶性固形物含量Soluble solids content 1-0.052 0.272果柄保鲜指数Stem freshness index-0.231-0.127-0.112-0.112-0.103果胶甲酯酶活性Pectin methylase activity-0.189纤维素酶活性Cellulase activity-0.050丙二醛含量Мalondialdehyde content 0.175淀粉含量Starch content-0.013淀粉酶活性Amylase activity-0.494*1-0.844**1 0.880**-0.863**0.881**-0.865**0.889**-0.883**0.889**-0.883**0.848**-0.824**0.842**-0.851**-0.119 0.033-0.881**0.918**0.911**-0.921**-0.095 0.003 1 0.925**0.920**0.950**0.931**0.836**-0.294-0.946**0.848**-0.007 1 0.985**0.976**0.980**0.839**-0.397-0.963**0.845**-0.216 1 0.977**0.971**0.835**-0.320-0.944**0.876**-0.224 1 0.975**0.832**-0.303-0.954**0.876**-0.156 1 0.779**-0.427*-0.940**0.791**-0.236 1-0.070-0.858**0.871**0.157 1 0.294-0.021 0.447*1-0.876**0.054 1-0.037 1
3 讨 论
梨果实采后仍进行着一系列生命活动，通过自身呼吸作用消耗营养物质，导致细胞发生分解，加速了果实软化，同时加速了蒸腾作用和内外大气之间的水分交换，导致贮藏期间质量下降[34]。有研究人员[35]发现，高渗CO2保鲜袋内CO2透气性更强，与普通的МAP 相比，除能够调控果实的呼吸作用外，还能降低袋内CO2的积累，但透过率有限。本研究发现，秋月梨МAP扎口包装短期处理3 d，由于果实的呼吸作用，不同处理的高渗CO2保鲜袋内CO2浓度仍迅速升高至一定水平，其中高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理袋内CO2含量始终低于其他处理（CK除外），O2含量始终高于其他处理（CK除外）。有研究表明，不同浓度的壳聚糖涂膜能够有效降低翠冠梨果实的呼吸强度[27]，在低温条件下，低浓度壳聚糖（0.5%）对梨果实呼吸强度无显著影响，而壳聚糖涂膜浓度为2%时能够显著抑制梨果实呼吸作用[35]，也有研究[36]指出，壳聚糖涂膜在果皮表面形成的半透膜堵塞了果皮表面的孔，导致果实内气体的扩散受到阻碍。在本试验中，3 d 短期的扎口包装期间，МAP协同壳聚糖涂膜处理可能进一步抑制了秋月梨果实的呼吸，减少了袋内的O2消耗和CO2积累。
本试验表明，常温条件下扎口包装3 d后开袋敞口继续贮藏至第19天期间，高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理均对秋月梨果实的呼吸有抑制作用。高渗CO2保鲜袋单一处理果实的呼吸高峰出现时间与CK相比延迟4 d，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理与CK相比延迟6 d，同时高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理相比于CK、高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的乙烯高峰出现时间延迟2 d。有研究[37]表明，1-МCP 处理能够通过调控梨果实货架期内的呼吸速率、乙烯释放速率以及乙烯合成相关酶活性，从而延缓果实的软化衰老。整个常温贮藏期间，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理果实硬度下降速度慢，失重率在贮藏期间也始终低于CK 和高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理，表明高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理可能通过抑制秋月梨的呼吸作用和内源乙烯的合成，从而延缓果实衰老和果实硬度的下降。也有研究表明，1-МCP 结合保鲜袋能够使梨果实品质保持更好[38]，与本研究中高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理延缓果实硬度下降，维持果实品质的结果一致。
贮藏期间果实硬度能够反映果实细胞排列状态，果实的弹性和胶黏性在一定程度上反映了细胞间结合力的大小[39]。研究表明，1-МCP 处理可以显著延缓贮藏期间果肉质地参数的下降，维持果实较好的质地，对黄金梨进行1-МCP处理可显著延缓果实硬度和品质的下降[40]。本研究中果实的内聚性、弹性、胶黏性、咀嚼性与果实硬度均呈极显著正相关，反映了不同处理秋月梨果实贮藏期间果实质地的变化。贮藏至第11 天时，CK、高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实硬度出现大幅度下降，同时果肉内聚性、胶黏性、咀嚼性降低幅度增加，贮藏至第15天时，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的果实硬度无明显变化，但果肉内聚性、胶黏性、咀嚼性与第1 天相比有较大幅度下降，说明贮藏期间虽然果实硬度无变化，但是果实内细胞排列结构发生变化，果肉的感官品质逐渐降低。通过果实硬度与质地综合分析，高渗CO2保鲜袋单一处理可将秋月梨果实贮藏时间延长至15 d，而高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理可将果实贮藏时间延长至19 d，说明高渗CO2保鲜袋+1-МCP缓释剂复合处理能够使秋月梨常温贮藏期间保持更佳的果实品质，保鲜效果更好。
研究发现，壳聚糖涂膜通过对果实起一定的气调作用，加上涂膜本身的抗菌性[31，41]，可以延长梨果实的贮藏期，减少果实腐烂。Candir等[42]研究发现，壳聚糖涂膜结合МAP 处理能够延缓Hicaznar 石榴果皮的颜色变化，减少果实失重，有效延长石榴的贮藏期和货架期，但也有研究[43]发现，涂膜的透气性不足可能会导致果实内部CO2累积，造成梨果实内部褐变和果皮损伤。在本试验中，敞口贮藏期间壳聚糖涂膜结合МAP处理出现了呼吸速率异常升高、果肉软化加快、失水率明显升高的现象，可能是由于果实内部CO2累积对秋月梨造成代谢紊乱，导致果实品质下降加快。通过对МDA含量、淀粉含量、AМS活性、PМE活性、CL活性的测定发现，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理常温贮藏期间МDA 含量上升幅度明显高于高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理，表明高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实细胞膜变化明显，软化和老化逐渐加快，贮藏期间高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的AМS 活性、PМE 活性、CL 活性高于高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理，进一步证实果实可能由于CO2累积造成代谢紊乱，导致软化加快。也有研究[44]发现，壳聚糖作为一种带负电荷的多糖可以与果胶结合，从而阻止果胶降解酶对细胞壁的作用，本试验研究中，由于壳聚糖涂膜对果实内外气体交换形成阻碍，会导致细胞壁降解加快，果实硬度降低[45]。
研究[46]发现，使用褪黑素对玉露香梨处理，可提高果实内抗氧化相关酶的活性，抑制果实硬度下降。本试验中由相关性分析可知，PМE活性与果实硬度和果肉内聚性、胶黏性、咀嚼性呈极显著相关，淀粉含量与果肉内聚性、胶黏性、咀嚼性呈极显著正相关。贮藏至第11天时，CK、高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的PМE活性出现大幅度下降，CL活性上升，淀粉含量出现大幅度下降，果实硬度和果肉内聚性、胶黏性、咀嚼性变化幅度增加，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理的PМE、CL活性变化幅度较小，淀粉含量与其他处理相比下降较为缓慢，果实硬度无显著变化。有研究表明，1-МCP 处理可以通过影响梨成熟的代谢途径如淀粉和蔗糖代谢等延缓果实的成熟老化和软化[47]。在本试验中，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理抑制了秋月梨果实PМE、CL活性，延缓淀粉含量降低，使秋月梨果实在贮藏期内维持较高的硬度和较好的品质。
4 结 论
通过对秋月梨进行高渗CO2保鲜袋结合不同保鲜剂处理，并对基础品质、软化相关酶活性以及果肉质地变化进行分析。结果表明，МAP 扎口包装3 d后敞口贮藏至第19 天期间，高渗CO2保鲜袋+壳聚糖处理的果实品质下降明显，软化速度加快；高渗CO2保鲜袋单一处理和高渗CO2保鲜袋+1-МCP 复合处理均能够有效延迟秋月梨果肉硬度的下降和质地的软化，抑制果实软化相关酶活性以及МDA 含量上升；与高渗CO2保鲜袋单一处理相比，高渗CO2保鲜袋+1-МCP复合处理效果更佳。本试验结果对秋月梨的采后保鲜及常温贮藏运输和货架销售具有一定的实际意义，也为研究高渗CO2保鲜袋结合1-МCP 复合处理调控秋月梨采后软化衰老的作用机制提供了理论依据。
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