余甘子(Phyllanthus emblica L.)是大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllanthus)一种热带、亚热带水果,其果实初食酸涩,良久乃甘,故名余甘子,又称油甘子、牛甘果、滇橄榄、庵摩勒等[1]。余甘子果实含有丰富的维生素C、氨基酸、微量元素、有机酸、酚酸类、黄酮类、多糖类等营养活性物质[2-3],为药食同源,在中国栽培历史悠久,自2000 a(年)前的东汉《异物志》到晋代《南方草本状》、明朝《本草纲目》,再到现代的《中国药典》均有收载,具有清热利咽,润肺化痰,健胃消食,收敛止泻,提高免疫力、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血压等功效,被联合国卫生组织指定为推广种植的三种保健植物之一,具有良好的食用、保健和药用价值[3-5]。除了干果做中药材,余甘子在广东、福建、广西等地以鲜食为主,还可加工生产各类果脯、蜜饯、果茶、果汁、复合饮料、果酱、果酒、果粉、冻干片、袋泡茶等[3,6],具有较高的经济效益。
近年来,随着余甘子果汁和茶饮风靡全国,对鲜食余甘子的需求量越来越大[7]。广东历来有鲜食余甘子的习惯,是中国鲜食余甘子最大的消费市场和种植区,也先后育成一批性状优良的地方品种(品系),包括玻璃油甘、白玉油甘、上湖仙油甘、珍珠油甘、柿饼油甘、狮头油甘、矮种油甘等,有力支撑广东余甘子产业的发展。酸涩味是影响余甘子鲜食品质的重要因素之一[7],随着市场的不断变化和人们对高品质鲜食余甘子的追求,一些酸涩味较重、口感差或果实小、产量低的地方品种已逐渐被淘汰,仅有少量种植。目前,广东省余甘子产业面临主栽品种单一、产期集中、酸涩味较重、口感不佳、适合鲜食和加工制汁的优质品种较少等问题[6],严重限制了余甘子产业的健康和高质量发展。因此,亟须培育品质优良、丰产性好和适宜鲜食、制汁的余甘子新品种,以促进品种结构优化和产业健康可持续发展。广东的余甘子自然分布广,野生种群类型多,蕴含丰富的变异类型,而且传统多为实生苗繁殖,后代间存在不同的变异,单株中间性状多,经过长期的自然进化和人工选择形成了丰富的种质资源。为了充分挖掘、利用广东余甘子种质资源,选育出适合鲜食和加工制汁的余甘子新品种,促进广东地区余甘子产业的健康发展,选育组开展了广泛的资源调查、田间观察和选种工作,经过多年的努力,选育出鲜食余甘子新品种绿田油甘(图1)。
图1 余甘子新品种绿田油甘
Fig. 1 A new P. emblica cultivar Lütianyougan
2013 年,在汕尾市陆河县河口镇田墩村发现大片树龄超过50 a(年)的野生油甘群体,经过综合鉴定分析,初步筛选出3 株鲜食口感好的优良单株,编号分别记为1~3 号。对上述优良单株,经过连续多年田间调查和品质分析,发现初选2 号优良单株系实生单株,该单株树龄超过百年,长势中等,分枝较多,树形伞状,结果性良好,果实个大、果皮光滑,果肉爽脆、酸甜适中,涩味轻,适合鲜食,且回甘浓,其果实大小和口感等与地方土种油甘明显不同,符合笔者制定的选育目标,拟命名为绿田油甘,进行系统性状观察调查。2014年从该2号优良单株母树采集枝条作为接穗,以地方土种油甘为砧木,在陆河县河口镇田墩村开展高接试验。经过田间观察分析,2014 年从母树V0 采集枝条作为接穗,发现其高接后代(V1)性状和品质保持不变;从2016 年开始,又从V1 后代采集枝条高接到土种油甘树上(V2 代),经连续多年多代嫁接比较发现,绿田油甘嫁接后代仍能保持母树的优良生物学性状,表现性状稳定。2018—2022 年在汕尾市、揭阳市、汕头市等地进行区域品种比较试验,并对其果实的可溶性固形物、维生素C、可滴定酸、总糖含量等理化品质指标进行检测,连续多年田间观察和品质分析结果表明,绿田油甘生长势强,树冠呈伞形,分枝力较强,没有明显主干,适应性较强,其果实品质优良,口感好、涩味轻、回甘浓,商品性佳。2022 年10 月通过专家现场审查,2023年11月通过广东省农作物品种审定委员会审定,定名为绿田油甘(编号为粤评果20230009)。
为判定绿田油甘是一个新的余甘子资源,选取绿田油甘、土种油甘、上湖仙油甘、矮种油甘、珍珠油甘、白玉油甘、狮头油甘、玻璃油甘、柿饼油甘和六月白油甘等余甘子种质的新生健康叶片,采用CTAB法提取基因组DNA,参照加拿大哥伦比亚大学UBC公布的96条引物序列,筛选出10条多态性好且条带清晰的ISSR 引物用于品种分子鉴定(引物序列见表1)。利用该10条ISSR引物对不同余甘子种质DNA进行PCR 扩增,共获得725 条清晰条带,其中“841”引物的扩增结果见图2-A。利用NTSYS-pc2.1 软件计算遗传相似系数,并进行相似性聚类分析。如图2-C 所示,绿田油甘(C4)及其母树(C5)单独聚为一类,与其他余甘子资源处于不同类群。
表1 优选的10 条ISSR 引物
Table 1 Selected 10 ISSR primers
Note:N = (A,G,C,T);Y = (C,T);D = (A,G,T) (i.e. not C);V = (A,C,G) (i.e. not T).
引物编号Primer number 809 825 826 827 841 851 857 888 890 891引物序列(5'-3')Primer sequence (5'-3')AGA GAG AGA GAG AGA GG ACA CAC ACA CAC ACA CT ACA CAC ACA CAC ACA CC ACA CAC ACA CAC ACA CG GAG AGA GAG AGA GAG AYC GTG TGT GTG TGT GTG TYG ACA CAC ACA CAC ACA CYG BDB CAC ACA CAC ACA CA VHV GTG TGT GTG TGT GT HVH TGT GTG TGT GTG TG
图2 绿田油甘遗传稳定性、多态性和聚类分析
Fig. 2 Genetic stability, polymorphism and cluster analysis of Lütianyougan and other varieties
为测定绿田油甘嫁接后代的遗传稳定性,分别从母树(V0)和嫁接后代(V1、V2和V3)提取DNA进行PCR 扩增,两条引物“890”和“891”的扩增结果均表明,嫁接后代V1、V2 和V3 与母树V0 无差异条带(图2-B),能保持母树的稳定遗传性状。
绿田油甘树姿开张,树势旺盛,树冠呈圆伞形,疏密相间,主干不明显,分枝能力强。树皮灰褐色,老枝具有灰白色圆点状皮孔;小枝条纤细,具有致密的纵行纹理。幼年树一年抽梢3~4 次,成年结果树一年抽发春梢和夏梢2 次梢,春梢结果性较差,夏梢抽梢较短。2 年生树冠幅可达2.4 m×2.6 m,株高1.58 m,茎粗5.9 cm,一级分枝2~3 个;3 年生树冠幅可达2.7 m×3.0 m,株高1.73 m,茎粗7.2 cm,一级分枝2~5 个。奇数羽状复叶,长12.3~25.8 cm;小叶数19~45枚,2列互生,嫩叶黄绿色,成熟叶片浓绿,革质,矩圆形,小叶片长1.66~2.81 cm,宽0.63~0.88 cm。花为白色,花瓣6 瓣,聚伞状花序由多朵雄花和1 朵雌花或全为雄花组成,生于羽状复叶中下部小叶叶腋。雌雄同株异花,雄花花梗长1.0~2.5 mm,3 雄蕊,雄蕊黄色,花药直立,长圆形,顶端具短尖头,药室平行,纵裂;雌花花梗长约0.5 mm,子房卵圆形,3室,3 花柱,基部合生,顶端2 裂,裂片顶端再2 裂。果实扁圆形,果棱明显,果腹线6条;果皮光滑,有光泽,未成熟时皮色青绿,成熟后果皮黄绿色;果肉浅绿色,肉质爽脆,纤维少、化渣,涩味淡,回甘味浓。
绿田油甘果实平均单果质量11.0 g,最大单果质量达17.34 g;果实平均纵径22.85 mm,平均横径29.30 mm,果形指数0.78,果核质量0.82 g,可食率92.6%(表2)。果实扁圆形,果皮黄绿色,果面光滑;果肉浅绿色,肉质爽脆、化渣(表3);可溶性固形物含量(w,后同)9.44%,总糖含量7.2 g·100 g-1,还原糖含量6.9 g·100 g-1,蔗糖含量0.28 g·100 g-1,可滴定酸含量10.81 g·kg-1,维生素C 含量294.0 mg·100 g-1,粗纤维含量1.0%,单宁含量8.66 mg·g-(1表4)。与对照土种油甘相比,绿田油甘果实大,果肉厚,可食率高,果实形状、大小和种皮颜色也明显不同,并且可滴定酸、单宁和粗纤维含量均显著降低,涩味轻,酸甜适中,口感好,回甘味浓,大小均匀,整齐度高,商品性好。
表2 绿田油甘与土种油甘果实特性比较
Table 2 Comparison of fruit characteristics of Lütianyougan and Tuzhongyougan
品种Cultivar绿田油甘 Lütianyougan土种油甘 Tuzhongyougan单果质量Single fruit mass/g 11.00 7.30纵径Longitudinal diameter/mm 22.85 9.53横径Transverse diameter/mm 29.30 21.43果形指数Fruit shape index 0.78 0.84果核质量Kernel mass/g 0.82 0.76种子数Number of seeds 6 6种子质量Seed mass/g 0.026 0.019可食率Fruit edible rate/%92.6 89.7
表3 绿田油甘与土种油甘果实感官特性比较
Table 3 Comparison of fruit sensory characteristics of Lütianyougan and Tuzhongyougan
品种Cultivar绿田油甘Lütianyougan果实形状Fruit shape扁圆形Oblate果皮Pericarp黄绿色、光滑Yellow-green,smooth涩味Astringent轻Light酸味Sour中等Medium回甘味Aftertaste浓Strong土种油甘Tuzhongyougan近圆形Suborbicular黄绿色、光滑Yellow-green,smooth果肉Pulp浅绿色、爽脆、化渣Light green,crisp andslagging浅绿色、爽脆、较化渣Light green,crisp and light slagging重重浓Deep Deep Strong种子Seed三棱形,种皮黑褐色Prismatoidal,seed coat black brown三棱形,种皮黄褐色Prismatoidal,seed coat yellowish-brown
表4 绿田油甘与土种油甘果实品质比较
Table 4 Comparison of fruit quality between Lütianyougan and Tuzhongyougan
品种Cultivar绿田油甘Lütianyougan土种油甘Tuzhongyougan w(可溶性固形物)Soluble solids content/%9.44 10.50 w(维生素C)Vitamin C content/(mg·100 g-1)294.0 332.0 w(总糖)Total sugar content/(g·100 g-1)7.2 5.9 w(还原糖)Reducing sugar content/(g·100 g-1)6.9 5.6 w(蔗糖)Sucrose content/(g·100 g-1)0.28 0.28 w(可滴定酸)Titratable acid content/(g·kg-1)10.81 19.52 w(单宁)Titratable acid content/(mg·g-1)8.66 14.40 w(粗纤维)Crude fibre content/%1.0 1.3
3.3.1 生长结果习性 绿田油甘树势健壮,老熟枝条为主要结果母枝,羽状复叶可连续多年从1 年生以上结果母枝同一萌发部位抽发出1~5 个,落叶时整个脱落;聚伞花序伴随春梢而萌发,抽发能力强,发于羽状复叶中下部小叶叶腋;结果母枝连续结果能力强,自然授粉坐果率高,在50%以上。嫁接苗第2 年可开花结果,3 年生树和4 年生树每666.7 m2产量约为654.0 kg和1602.0 kg。
3.3.2 物候期 在广东潮汕地区,3 月上中旬开始萌芽抽新梢,3月下旬至4月初始花,4月中旬盛花,4月下旬花谢,花期30 d 左右;果实在10 月上旬到11月上旬成熟,成熟期和挂果期较长。整个营养生育期240 d 左右,为晚熟品种。与土种油甘相比,绿田油甘果实成熟期晚10~15 d。
3.3.3 适应性和抗逆性 在汕尾、汕头、揭阳等各试点的树体生长健壮,树势旺盛,结果性好,稳产性强,且产量和果实品质优于土种油甘,表现为广适性。在年降水量1200 mm 以上、年平均气温21 ℃以上、极端最低气温大于1 ℃的区域种植可正常生长,喜偏酸性土壤,耐旱性强,在山地丘陵和坡地均可正常生长,在排水性好的田地也可种植,结果性状良好。
平地或缓坡地株行距宜3 m ×4 m 至4 m ×5 m,山坡地株行距宜3 m ×4 m,每666.7 m2种植50~65株为宜。种植前挖好定植穴,施足基肥,每穴施腐熟农家肥10.0~20.0 kg或商品有机肥5.0~10.0 kg、复合肥1.0 kg。可通过定植嫁接苗或高接换种等途径建园。
以培养低干、多主枝、分枝角度较大的开心形树冠为主。2~3 年生幼年树生长时期,在主干高50~60 cm处剪顶定干,再在主干上培养3~4个主枝;待主枝长至约45 cm 时剪顶,培养4~6 个副主枝,选留枝条应四面错落伸展,分布合理。结果树树高应控制在300 cm 以下,树冠有效结果母枝长度垂直方向控制在250 cm 以内,水平方向控制在200 cm 以内。结果母枝以长枝、中枝为主,主要采用抹芽和疏枝等方式,避免短截。
4.3.1 幼年树 定植成活后开始追肥,在春梢、夏梢和秋梢抽发前各施肥一次。植后第一年每株施尿素25.0 g 和复合肥25.0~50.0 g,以后每年增加50%至1倍的施肥量。
4.3.2 结果树 按平均单株产量50.0 kg 计,每株年施豆饼或花生麸1.0~2.0 kg、有机肥5.0~7.5 kg、复合肥1.0~2.0 kg。每年施肥3 次:促梢保果肥在2 月中下旬春梢萌发前施用,以氮、钾肥为主,配合磷、钙肥;壮果促梢肥于6月中旬幼果开始膨大期施用,以钾肥、磷肥为主,配施氮肥;采果复壮肥在采果后,以有机肥为主。
在广东地区,余甘子病虫害相对较少,以防治锈病、炭疽病、介壳虫和红蜘蛛为主。应贯彻“预防为主,综合防治”的植保方针,加强农业栽培管理,化学防治应抓住病害初发期或害虫低龄期用药,减少农药使用量。
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Breeding report of a new table Phyllanthus emblica cultivar Lütianyougan