欧洲李（Prunus domestica L.）是中国目前拥有且保护的蔷薇科李属核果类经济果树之一[1]，不仅在全球食品供应链中占有重要地位，同时在植物学和园艺学的研究领域中也具有很高的学术价值。在国内也称作西洋李，俗称卡尔玉鲁克、西梅、酸梅，商品名称统称为新梅[2-3]。2010 年11 月，通过新疆林木良种审定委员会将欧洲李品种法兰西、斯泰勒、女神审定为新梅-1 号、新梅-2 号、新梅-3 号[3]。种植区域的温度、湿度、光照、水分、土壤等外在因素以及果实自身胚、植物激素、细胞形态等内在因素的生长动态会对果实生长发育产生影响[4-5]。近年来，新疆地区的欧洲李种植业发展迅速，种植面积逐年增加，同时引进了众多优质品种。特别是在塔城、巴州等地，欧洲李的种植范围不断扩大，形成了区域性的规模化生产[6]。其中喀什地区栽培面积最大，2021 年为4.25 万hm2，法兰西是该地欧洲李主栽品种之一，女神、斯泰勒等品种是继法兰西之后的新品种[7]。随着新疆欧洲李栽培规模的不断扩大，其产业发展受到果实易变软和不易保存问题的制约，导致采后大量浪费，这不仅影响了农民的收入，也限制了欧洲李产业的可持续发展。
跟踪观测果实物候期及形态是探究果实生长发育特征的基本指标。在果实外观形态变化研究方面，很多研究人员从果实大小和果皮色泽方面进行探索。冯贝贝[8]以阿克苏地区所种植的欧洲李品种女神、斯坦勒、法兰西为主要研究对象，对3 个品种果实生长发育动态进行研究分析后发现三径和单果质量生长都呈“双S”曲线。此外，有研究显示李品种果实的生长发育规律与桃、杏等核果类果实生长动态基本相同[9-10]。Mohammad 等[11]研究Carissa congesta 果实在不同生长发育阶段的长度、单果质量，发现其形态特征可很好地符合逻辑模型，在第二阶段中生长2 周后立即呈指数增长，7 周后生长恒定，之后衰老。综上所述，尽管对个别欧洲李品种在果实生长发育动态变化方面有所研究，但有关其他品种的生长发育特征有待进一步完善，以便为合理调控水肥管理提供理论依据。
核果由外果皮、中果皮、内果皮三部分构成[12]。外果皮分为表皮和亚表皮，中果皮是果实的肉质部分，木质化内果皮包围种子[13-14]。目前，关于核果组织结构的形态学变化研究在桃[13，15-16]、杏[12]、樱桃[17]等中报道较为细致。王荣花等[12]跟踪观测核果类杏果实发育过程中表皮、中果皮细胞、维管束的分化进程，发现进入果实生长发育期后，果实生长速率与果实细胞直径变化规律一致，均呈现“快-慢-快”的变化。刘庆华等[17]研究报道，甜樱桃果实外果皮表皮细胞早期呈径向伸展，果实成熟时则横向伸展；中果皮主要由薄壁细胞组织和分布其中的维管束组成。Mohammad 等[11]通过研究Carissa congesta 果实组织细胞的生长发育特征发现，在第二生长阶段细胞扩张，第三生长阶段果实达到生理成熟，细胞生长停止，薄壁细胞不规则且松散堆积，维管束组织随着生长发育可见度逐渐清晰最后下降。关于欧洲李在果实显微结构变化方面的研究，主要集中在种子形态及其组织构造[7]和花芽分化的组织解剖学方面[18-19]。欧洲李在接近收获时遭遇大雨可能导致果肉易开裂[20]，但关于裂果因素研究多围绕代谢基因差异表达与红枣裂果的关联[21]、开裂指数与其他品质参数的关联[22]、甜樱桃果实的中果皮细胞体积与外果皮膨压关联等进行报道，与欧洲李相关的裂果发育机制研究极少。综上所述，至今还未见国内外有关欧洲李果实生长发育阶段显微结构变化的专门研究报道，外观形态与显微结构之间存在的关系和规律尚不十分明确[23]。
笔者在本研究中对6 个欧洲李品种在不同发育阶段的果实进行动态监测，通过物候期观测、石蜡切片法等明确果实发育规律及显微结构的动态变化特征，以期为合理调控栽培管理措施、预防雨后裂果、改善果实品质提供科学依据，并完善部分细胞学生长发育理论。
1 材料和方法
1.1 试验材料
以7 年生欧洲李品种法兰西、理查德早生、斯泰勒、女神、塔城酸梅、总统为试材，均为桃树砧木且树体健康。试验基地位于新疆农科院轮台果树资源圃，北纬41°47′，东经84°13′，暖温带大陆性干燥气候，年平均气温10.9 ℃，10 ℃有效积温4081 ℃，无霜期192 d，年总降水量65.6 mm。试验选用无病害果实进行物候期观测及取样，在资源圃和新疆农业大学园艺学院实验室进行。
1.2 试验方法
1.2.1 果实生长发育阶段外观形态指标的测定 采用无损采样法测定果实各形态指标。自盛花后10 d每品种选取2株果树从树冠四周随机选取10颗提前标记的果实，采用无损采样法对果实横径、纵径、侧径、单果质量等形态指标跟踪测量，每10 d 测1次[24]，共计15 个时期。根据公式（1）计算尺寸指数[25]：
1.2.2 果实生长发育阶段显微结构的观测 采用石蜡切片技术进行样本制片[8]，自盛花后10 d 及此后每20 d 在每个品种中选取2 个预先标记的果实避开缝合线、内果皮，纵切成1.0 cm×0.5 cm×0.3 cm小块，制作切片，使用Nikon 光学显微镜对组织切片进行观察、拍照，记录外果皮、中果皮及维管束显微结构特征。运用Image J分析果实组织显微图像，测量细胞参数，包括外果皮细胞层数、长度、宽度；果实纵切面中果皮细胞面积、周长、最大长度、最大宽度、纵横比及圆度（公式2，其值越接近1，细胞越圆）[26]。
1.3 数据处理
数据采用Excel 2019 统计；使用SPSS 21.0 进行单因素方差分析（ANOVA），当方差分析F 值有统计学意义（p＜0.05）时，运用最小显著性差异（LSD）检验将均值进行分离，运用Duncan新复极差法进行多重比较，利用Pearson相关矩阵对果实生长发育过程中各性状进行相关性分析；采用Origin 2019 绘制统计图；采用Photoshop CC 2019 进行图像组合与标注；表皮、亚表皮表格数据为平均值±标准误。
2 结果与分析
2.1 欧洲李果实物候期观测
由表1 可知，6 个欧洲李品种果实在盛花后10 d开始发育，并进入为期40 d的第一次果实膨大期；硬核期均持续20 d；第二次果实膨大期均持续30 d；在转色期，不同品种的持续时间存在差异，理查德早生、斯泰勒、塔城酸梅持续20 d，法兰西持续22 d，女神持续30 d，总统转色期最长为46 d。在整个发育周期中，理查德早生、斯泰勒、塔城酸梅周期较短，而总统的周期最长。塔城酸梅成熟期最早，总统最晚。
表1 欧洲李果实的物候期
Table 1 Phenological periods of European plum fruits
品种Variety法兰西France理查德早生Richard Early斯泰勒Stanley女神Empress塔城酸梅Tacheng Suanmei总统President盛花期Full-blossom period 4月15日Apr. 15th 4月15日Apr. 15th 4月15日Apr. 15th 4月15日Apr. 15th 4月13日Apr. 13th 4月15日Apr. 15th落花期Fading period 4月20日Apr. 20th 4月20日Apr. 20th 4月20日Apr. 20th 4月19日Apr. 19th 4月18日Apr. 18th 4月20日Apr. 20th第一次膨大期First expansion period 4月30日Apr. 30th 4月30日Apr. 30th 4月30日Apr. 30th 4月29日Apr. 29th 4月28日Apr. 28th 4月30日Apr. 30th硬核期Stone hardening period 6月11日Jun. 11th 6月11日Jun. 11th 6月11日Jun. 11th 6月9日Jun. 9th 6月8日Jun. 8th 6月11日Jun. 11th第二次膨大期Second expansion period 7月1日Jul. 1st 7月1日Jul. 1st 7月1日Jul. 1st 6月29日Jun. 29th 6月28日Jun. 28th 7月1日Jul. 1st转色期Color-change period 8月10日Aug. 10th 8月10日Aug. 10th 8月10日Aug. 10th 8月9日Aug. 9th 8月8日Aug. 8th 8月10日Aug. 10th成熟期Mature period 9月2日Sept. 2nd 8月30日Aug. 30th 8月30日Aug. 30th 9月10日Sept. 10th 8月28日Aug. 28th 9月26日Sept. 26th
2.2 欧洲李果实生长发育阶段的外观形态变化
由图1 可知，根据果实形态特征生长指标的变化趋势，可以将整个生长周期划分为4 个阶段。快速生长期（S1），即盛花后10～30 d，果实的纵径、横径、侧径、尺寸指数等形态指标均快速生长。缓慢生长期（S2），从盛花后40～100 d，果实各项指标增长较为缓慢，至盛花后100 d基本停止增长。稳定成熟期（S3），从盛花后110～130 d，果实各项指标保持稳定。生理落果期（S4），从盛花后140～150 d，除总统外，其他各品种陆续开始落果。
图1 欧洲李果实生长发育期间外观形态指标的动态变化
Fig. 1 Dynamic changes in appearance indexes of European plum fruits during growth and development
图1 （续） Fig. 1 (Continued)
2.3 欧洲李果实生长发育阶段的显微结构变化
2.3.1 外果皮细胞形态 如图2 所示，在整个生长发育阶段，表皮为单层结构，而亚表皮的层数和厚度随时间发生变化。结合表2可知，外果皮生长在4个阶段存在明显特征：盛花后20 d（S1）表皮及亚表皮细胞的形态参数显著小于40～100 d（S2），多数品种在S2 后期即盛花后80～100 d 显著增长。盛花后120 d（S3）进入第二次膨大期逐渐成熟。S4 外果皮细胞各项参数对照S3均有所下降。
图2 欧洲李果实生长发育期间外果皮显微结构的动态变化
Fig. 2 Dynamic changes in microstructure of the exocarp of European plum fruits during growth and development
表2 欧洲李果实生长发育期间表皮、亚表皮细胞形态学参数的动态变化
Table 2 Dynamic changes in morphological parameters of the epidermal and subepidermal cells of European plum fruit during growth and development
注：同一列不同小写字母表示同一品种同一指标不同生长发育阶段差异显著（p＜0.05）。下同。
Note：Different small letters in the same column indicate significant difference among different growth and development stages in the same variety at p＜0.05. The same below.
品种Variety盛花后时间Time after full-blossom/d 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140表皮Epidermis长Longitudinal diameters/μm 19.17±0.40 d 20.82±0.85 cd 22.68±0.59 bcd 23.99±1.64 bc 24.60±0.98 b 24.61±0.68 b 25.63±0.80 b 33.80±2.38 a 17.44±0.96 d 18.96±0.69 d 21.74±0.77 c 22.42±1.15 c 23.32±0.76 bc 23.86±1.05 bc 25.52±0.86 ab 27.47±0.77 a 17.11±0.57 c 17.93±0.64 c 18.09±0.74 c 13.54±0.41 d 23.92±1.16 b 24.34±0.54 b 28.83±0.96 a 22.54±0.96 b 20.79±0.86 d 21.69±1.13 cd 21.84±1.13 cd 22.38±0.44 bcd 23.38±1.55 bcd 24.78±1.61 bc 25.76±1.31 b 30.64±1.40 a 18.35±0.86 d 19.52±0.74 d 20.80±0.55 cd 21.33±1.10 bcd 23.19±1.31 bc 23.94±0.62 b 26.82±1.21 a 28.14±1.37 a 17.02±0.83 f 17.85±0.47 f 19.17±0.87 ef 20.20±0.66 de 21.67±0.81 cd 23.22±0.42 c 27.99±1.07 a 25.59±0.70 b宽亚表皮Subepithelial长Longitudinal diameters/μm 25.90±1.15 g 36.61±1.75 f 51.08±3.08 e 66.26±2.78 d 67.16±2.22 d 108.84±3.55 b 84.03±3.27 c 118.77±3.95 a 31.27±0.79 e 31.50±1.50 e 45.53±2.08 d 53.18±1.73 d 55.02±3.69 d 159.33±5.05 a 124.10±5.47 b 79.57±4.13 c 30.53±1.56 f 33.24±1.22 f 38.24±1.06 ef 42.09±2.34 e 52.29±2.66 d 132.52±5.66 a 100.47±3.59 b 69.91±2.86 c 31.26±1.55 d 39.92±2.92 cd 40.78±3.23 cd 47.98±4.71 bc 55.34±5.98 b 102.94±4.90 a 99.61±2.22 a 50.59±1.23 bc 29.88±0.93 e 44.46±3.13 d 45.73±3.17 d 48.94±2.31 d 62.45±7.60 c 63.63±2.50 c 89.19±2.24 a 78.61±3.02 b 39.60±2.00 d 81.64±3.63 a 51.06±1.82 c 51.51±1.93 c 70.53±2.44 b 84.62±4.48 a 81.64±3.63 a 68.40±1.98 b宽Equatorial diameter/μm 16.51±0.72 d 18.79±0.73 cd 21.84±0.73 c 35.82±2.20 a 37.10±1.74 a 34.75±1.40 a 26.03±0.94 b 36.43±1.44 a 15.88±0.52 d 18.92±0.79 d 25.88±1.30 c 27.91±1.00 c 28.29±1.58 c 60.39±2.38 a 48.87±3.19 b 30.27±1.38 c 17.22±0.66 e 18.89±0.95 de 22.04±1.06 cd 26.01±1.29 c 31.47±1.28 b 39.88±2.65 a 35.23±2.28 b 25.52±1.32 c 18.19±0.80 e 18.46±0.82 e 24.56±1.46 cd 25.81±1.83 c 26.19±1.54 c 40.19±2.35 a 33.92±1.17 b 20.91±0.97 de 17.93±0.91 d 18.09±0.84 d 21.50±1.17 cd 22.65±1.86 c 24.25±1.54 bc 27.39±1.31 ab 29.68±1.96 a 23.54±0.92 bc 20.69±0.53 d 21.09±0.85 cd 21.79±0.86 cd 23.65±1.17 bcd 29.55±1.02 a 30.52±1.36 a 26.40±1.05 b 24.20±1.15 bc法兰西France理查德早生Richard Early斯泰勒Stanley女神Empress塔城酸梅Tacheng Suanmei总统President Equatorial diameter/μm 9.01±0.28 d 14.69±0.50 c 15.59±0.58 c 15.96±0.81 c 16.45±0.43 c 18.67±0.71 b 21.40±0.72 a 21.15±0.64 a 11.16±0.45 c 11.93±0.61 c 12.24±0.39 c 14.18±0.61 b 14.40±0.47 b 15.08±0.47 ab 16.01±0.58 a 14.37±0.35 b 13.09±0.33 d 14.19±0.47 cd 14.74±0.50 c 14.89±0.75 c 15.45±0.52 bc 15.70±0.51 bc 17.24±0.43 a 16.64±0.48 ab 11.49±0.31 e 14.20±0.43 d 14.86±0.47 cd 15.27±1.09 bcd 15.45±0.79 bcd 16.43±0.59 bc 18.71±0.72 a 17.33±0.83 ab 10.94±0.40 c 12.24±0.42 bc 12.64±0.33 bc 13.43±0.68 b 12.74±0.31 bc 17.12±0.94 a 18.47±0.88 a 17.13±1.03 a 9.22±0.33 c 10.12±0.47 c 12.31±0.28 b 12.94±0.34 b 13.15±0.42 b 15.68±0.47 a 15.57±0.40 a 13.31±0.57 b
表皮细胞中，S1～S4 形状整齐，在不同阶段的大小基本一致。法兰西、总统的表皮细胞在前期为正方形，后期变为长方形。亚表皮细胞中，S1 塔城酸梅的参数在6 个品种间最小；法兰西亚表皮有5～6层，细胞多呈不规则椭圆形；理查德早生为5 层，呈椭圆形；女神为2 层，呈近圆形且厚度较薄；塔城酸梅为2～3 层，呈规则椭圆形；总统为3 层，呈椭圆形。S2～S3，亚表皮细胞迅速扩张，长度和宽度显著增长。S4 所有品种的亚表皮层数仅2～3 层，除法兰西外细胞宽度均显著下降，厚度变薄。
2.3.2 中果皮细胞形态 由图3、表3 可知，S1 欧洲李果实纵切面薄壁细胞排列紧密，法兰西、理查德早生、塔城酸梅的细胞形态较一致，而女神、总统的细胞形态参数大小不一。S2 各品种薄壁细胞的面积、长、宽、周长均显著增加，女神和塔城酸梅圆度显著变化，女神和总统细胞较相似，塔城酸梅细胞呈长椭圆形，法兰西细胞呈近圆形。S3 细胞进一步发生明显扩大，斯泰勒面积最大。综上，通过观察欧洲李果实生长发育间的显微结构动态变化，发现6 个品种存在一定差异。
图3 欧洲李果实生长发育期间纵切面中果皮细胞显微结构的动态变化
Fig. 3 Dynamic changes in mesocarp cell microstructure in longitudinal section of European plum fruits during growth and development
表3 欧洲李果实生长发育期间纵切面中果皮细胞形态学参数的动态变化
Table 3 Dynamic changes in the morphological parameters of the mesocarp cells in longitudinal section of European plum fruits during growth and development
品种Variety盛花后时间Time after full-blossom/d细胞大小Cell size面积Area/μm²长宽Longitudinal diameters/μm Transverse diameter/μm周长Perimeter/μm细胞形状Cell shape纵横比Aspect ratio圆度Roundness法兰西France理查德早生Richard Early 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 2 547.86 d 4 249.84 d 17 235.50 c 17 319.19 c 22 147.91 b 33 867.24 a 34 214.73 a 35 029.82 a 3 845.89 d 6 664.41 d 16 799.69 c 22 595.87 c 68.63 e 91.84 e 215.81 c 182.59 d 258.91 b 273.95 ab 286.98 ab 297.31 a 89.43 d 112.11 d 208.12 c 230.24 bc 46.21 d 54.29 d 89.20 c 118.13 b 100.33 c 153.35 a 153.69 a 146.80 a 51.64 e 66.61 e 92.40 d 120.79 c 186.72 f 252.01 e 558.44 c 494.64 d 634.46 b 715.80 a 716.69 a 714.16 a 234.84 e 307.77 d 520.88 c 639.39 b 1.51 d 1.74 cd 2.52 a 1.63 cd 2.59 a 1.81 bcd 1.89 bc 2.08 b 1.74 b 1.72 b 2.34 a 1.98 b 1.11 c 1.26 b 1.46 a 1.17 bc 1.46 a 1.22 bc 1.20 bc 1.18 bc 1.16 c 1.24 bc 1.58 a 1.60 a
表3 （续） Table 3 (Continued)
品种Variety盛花后时间Time after full-blossom/d细胞大小Cell size面积Area/μm²长宽Longitudinal diameters/μm Transverse diameter/μm周长Perimeter/μm细胞形状Cell shape纵横比Aspect ratio圆度Roundness斯泰勒Stanley女神Empress塔城酸梅Tacheng Suanmei总统President 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 10 20 40 60 80 100 120 140 23 452.57 c 32 778.52 b 58 537.04 a 59 155.12 a 2 703.46 d 6 402.31 d 14 467.75 c 17 160.85 c 19 726.37 c 41 373.01 b 66 687.37 a 68 114.22 a 3 206.50 d 6 538.50 d 9 385.74 d 9 851.50 d 21 151.96 c 41 885.06 b 60 129.78 a 61 050.45 a 1 974.42 e 6 254.07 de 11 276.58 cd 15 058.19 bc 18 244.65 b 27 162.60 a 31 366.97 a 32 289.42 a 3 783.50 e 4 249.84 d 17 235.50 c 17 319.19 c 22 147.91 b 33 867.24 a 34 214.73 a 35 029.82 a 247.64 bc 261.94 b 342.16 a 355.43 a 67.53 e 118.59 d 175.96 c 177.08 c 184.89 c 304.36 b 396.50 a 413.89 a 75.84 f 125.86 e 140.06 e 155.24 e 246.85 d 304.01 c 355.47 b 400.17 a 56.00 d 113.02 c 144.45 b 168.69 b 172.44 b 252.55 a 254.42 a 244.11 a 80.51 e 91.84 e 215.81 c 182.59 d 258.91 b 273.95 ab 286.98 ab 297.31 a 119.76 c 148.56 b 192.33 a 207.41 a 44.21 e 65.27 d 111.47 c 124.16 c 126.72 c 164.89 b 211.57 a 229.29 a 52.47 f 71.08 ef 76.61 d 76.59 d 111.95 c 174.98 b 214.05 a 226.92 a 43.90 e 80.51 d 98.96 c 107.98 c 106.17 c 141.78 b 149.43 ab 163.52 a 57.20 e 54.29 d 89.20 c 118.13 b 100.33 c 153.35 a 153.69 a 146.80 a 625.94 b 706.16 b 922.28 a 968.99 a 185.08 e 284.48 d 461.05 c 510.28 c 528.95 c 777.74 b 1 025.34 a 1 079.93 a 205.34 g 297.48 f 389.36 e 397.62 e 605.54 d 803.68 c 1 019.51 b 1 127.29 a 157.91 d 264.29 c 402.14 b 473.91 b 476.16 b 647.54 a 696.18 a 666.27 a 221.13 f 252.01 e 558.44 c 494.64 d 634.46 b 715.80 a 716.69 a 714.16 a 2.11 ab 1.89 b 1.85 b 1.73 b 1.53 c 1.93 a 1.59 bc 1.50 c 1.56 bc 1.87 a 1.91 a 1.81 ab 1.46 c 1.86 b 1.83 b 2.13 a 2.25 a 1.75 b 1.69 bc 1.81 b 1.30 c 1.51 bc 1.48 bc 1.59 ab 1.79 a 1.80 a 1.71 ab 1.50 bc 1.43 b 1.73 a 1.85 a 1.31 b 1.47 b 1.86 a 1.72 a 1.77 a 1.35 b 1.29 bc 1.18 c 1.27 bc 1.08 c 1.09 c 1.20 bc 1.36 a 1.23 b 1.17 bc 1.27 ab 1.37 a 1.07 f 1.19 ef 1.52 b 1.35 cd 1.40 bc 1.23 de 1.42 bc 1.67 a 1.02 d 0.95 d 1.19 bc 1.34 a 1.23 b 1.24 b 1.24 b 1.12 c 1.05 de 1.26 b 1.46 a 1.17 bc 1.46 a 1.22 bc 1.20 bc 1.18 bc
2.3.3 维管束形态 如图4 所示，法兰西纵切面维管束集中分布于果实中心，纵向分布的维管束较多，排列整齐；横切面维管束则均匀分布于果实的中果皮区域。理查德早生、斯泰勒纵切面维管束均匀分布于果实的中果皮；横切面维管束呈放射状以内果皮外围为中心向外果皮发散排列，且靠近中心的维管束更为发达，而靠近果实外围的维管束则相对较小。女神的维管束排列规律与理查德早生相似，但纵切面维管束更加密集且较小；横切面中维管束较理查德早生数量更少。塔城酸梅果型最小，纵切面维管束排列零散，横切面呈放射状分布，整体可见度低。总统纵切面维管束分布规律接近理查德早生，横切面条状维管束清晰可见，同样呈放射状分布。
图4 欧洲李果实S1 维管束分布显微图片
Fig. 4 Micrograph showing vascular bundle distribution in European plum fruits at S1
如图5、图6所示，S1所有品种维管束均较小，但是纵切面中理查德早生维管束在中果皮所占密度较高；横切面中理查德早生、斯泰勒、女神的维管束密度也较高，总统的维管束横切面直径、面积大于其他品种。S2 的中果皮区域维管束切面中已出现木质部、韧皮部，横切面维管束结构变化显示法兰西的木质部、韧皮部面积最大，导管分子呈放射状延伸生长，而总统的维管束直径较小；纵切面结构也表明，法兰西、理查德早生、斯泰勒的维管束在快速生长，总统则生长较慢。S3 果实逐渐成熟，各品种除总统维管束发育为扇形外，其余品种基本发育完善，木质部多数呈现为圆形，分化清晰，可见度高。S4女神韧皮部缺失，塔城酸梅维管束较小，而总统维管束此时发育完善、近似圆形，所有品种的维管束结构更为松散。
图5 欧洲李果实生长发育期间维管束纵切面显微结构的动态变化
Fig. 5 Dynamic changes in microstructure of longitudinal section of vascular bundles of European plum fruits during growth and development
图6 欧洲李果实生长发育期间维管束横切面显微结构的动态变化
Fig. 6 Dynamic changes in microstructure of cross section structure of vascular bundle of European plum fruits during growth and development
2.4 欧洲李果实细胞形态学参数与外观形态指标的相关性分析
由表4 可知，在欧洲李果实的生长发育周期中，细胞形态与外观形态存在不同程度的相关性。果实表皮细胞宽度与果实纵径、侧径、尺寸指数、单果质量呈显著正相关。亚表皮细胞宽度及中果皮细胞面积、长、宽、周长、圆度分别与果实外观形态指标呈极显著正相关。综上表明，果实细胞越大，果实外观形态相关指标越大。
表4 欧洲李果实细胞形态学参数与外观形态指标的相关性
Table 4 Correlations between cell morphological parameters and appearance indexes of European plum fruits
注：*表示在 0.05 水平上显著相关，**表示在 0.01 水平上极显著相关。
Note：* indicates significant correlation at the 0.05 level, ** indicates highly significant correlation at the 0.01 level.
细胞参数Cellular parameter表皮Epidermis亚表皮Subepisermis中果皮Mesocarp长 Longitudinal diameter宽 Equatorial diameter长 Longitudinal diameter宽 Equatorial diameter面积 Area长 Longitudinal diameter宽 Equatorial diameter周长 Perimeter纵横比 Aspect ratio圆度 Roundness果实形态Fruit morphology纵径Longitudinal diameter-0.077 0.097*-0.089 0.156**0.137**0.144**0.153**0.190**0.001 0.224**单果质量Single fruit mass-0.008 0.098*0.045 0.252**0.256**0.229**0.284**0.299**-0.037 0.218**横径Transverse diameter-0.024 0.082-0.036 0.191**0.184**0.169**0.215**0.230**-0.044 0.203**侧径Lateral diameter-0.015 0.103*-0.012 0.211**0.203**0.188**0.235**0.251**-0.046 0.207**尺寸指数Size index-0.041 0.096*-0.049 0.187**0.175**0.168**0.201**0.225**-0.028 0.215**
3 讨 论
3.1 欧洲李果实的生长发育规律
果实物候期观测是明确果实生长发育特性至关重要的环节，整个周期中每个阶段的时间长度和生物学特性都会对最终果实品质及产量的形成产生显著影响[27]。Zhang 等[28]研究表明果实膨大期是果实及品质形成的关键时期，冯军仁等[29]也指出在果实快速生长阶段采取减少灌溉、控制氮肥、增加磷钾肥及微量元素、调节通风透光条件的方式可提高果品质量。结合本研究基础可推断在此时期对欧洲李果实的栽培管理进行调控，很可能将影响果品及市场价值。本研究试材欧洲李的发育周期为121～160 d，与此周期接近的是在阿克苏地区欧洲李生长周期为125～145 d；而对照杏李果实的发育周期为89～131 d [18]，欧洲李的周期更长。物种、环境条件、树龄等自身及栽培管理条件的差异可能都会导致发育期不同。前人研究欧洲李果实外观动态变化为“双S”曲线[8]，本研究结果表明“双S”曲线不是十分明显，推测可能是试验中参考刘旭[24]的采样方法，试验材料不同，加之观测期间果实样本数量较少或采样频率不够密集所致。
3.2 欧洲李果实显微结构的动态变化
在核果的形态学研究中，果实细胞形态学的动态变化分析对探究果实生长发育具有重要意义。笔者在本研究中通过对6 个欧洲李品种的果实详细观察分析S1～S4 的细胞，发现外果皮逐渐扩张后，S4亚表皮长度增加而厚度减薄，这一现象与桃外果皮细胞在生长发育过程中逐渐变长变大的趋势相吻合[30]。本研究的中果皮组织细胞随着生长发育的推进，其面积及周长等指标在S1～S3 显著增长，并在S3～S4 趋于稳定。这一动态变化与Carissa congesta的中果皮细胞在S1～S2 伸长和膨胀，以及排列松散相似[11]。维管束作为植物体内水分及营养物质运输的主要通道，其结构的变化直接影响着水分的运输效率和果实的品质形成[31-32]。研究不同发育期维管束结构的动态变化，对了解影响水分运输的因素及其对果实品质的影响具有重要意义[33]。在本研究中，随着欧洲李果实的发育，中果皮逐渐分化出清晰的木质部、导管、韧皮部，其结构在发育后期变得更加松散，这一现象与桃果实的维管束发育动态相似[16]。
3.3 果实显微结构对生长发育及品质的影响
核果的外果皮起着重要的作用，它作为一个机械保护屏障，防御生物或非生物因素[34]。当角质层、表皮、下皮层的生化特性受到影响时果皮就会出现裂缝，欧洲李也会在接近收获时遭遇大雨后导致钙离子等阳离子失衡而出现裂果[20]。这是一种生理病害，严重降低新鲜度和果品质量，损害水果的商品价值，给生产者造成重大经济损失[21，35]。Grimm 等[36]通过研究甜樱桃果实的中果皮细胞体积、外果皮膨压发现果皮表面微裂纹随着少数中果皮细胞体积的增加而发展为大裂纹，并很快伴随细胞破裂造成裂果；Mu等[37]研究发现番茄的果皮组织扩张是中果皮细胞大小增加而引起的，并不由细胞层数和数量增加所引起，本研究相关性分析结果显示核果欧洲李外果皮的厚度及大小也受中果皮细胞显著影响；因此研究果实细胞生长发育动态变化，结合前期物候期观测可作为调控果实发育进程相关栽培手段的重要参考依据，以期有效预防和控制裂果危害。未来可进一步以欧洲李果实细胞学对外果皮扩张的影响及裂果相关的分子机制为课题进一步探究裂果形成的原因。李红光等[26]推断鲜果质地、硬度与细胞圆度相关，而Zhang 等[38]进一步指出果实硬度对贮藏和运输存在重要影响，基于这些观点，欧洲李果实在显微结构对果实品质及储运的影响方面值得进一步研究与验证，同时可以深入探讨外部环境因素对果实发育的影响。未来这些研究方向不仅有助于笔者更深入地了解果实发育的生物学机制，而且对优化果品生产、果实储存条件都具有潜在的应用价值。
4 结 论
欧洲李果实物候期为121～160 d。随着果实生长，外观形态变化分为4 个阶段：快速生长期S1、缓慢生长期S2、稳定成熟期S3、生理落果期S4。细胞学水平上，发生了细胞扩张，以增加果实外观大小。欧洲李作为广泛种植、研究人员密切关注的研究对象，果实生长发育研究将进一步为优化果树生产栽培条件提供科学依据。
[1] 张加延，周恩. 中国果树志-李卷[M]. 北京：中国林业出版社，1998：1-3.ZHANG Jiayan，ZHOU En. Records of Chinese fruit trees-Plum[M]. Beijing：China Forestry Publishing House，1998：1-3.
[2] 努尔曼·阿不拉，沙比尔江·阿巴克，阿卜杜许库尔·牙合甫，故丽米热·卡克什. 5 个西梅品种光合特性、叶绿素及产量的对比研究[J]. 新疆农业科学，2013，50(9)：1626-1631.Nuriman Abla，Sabirjan Appak，Abduxukur Yakup，Gulmire Kakax. Study on the photosynthetic characteristics，chlorophylls and yield of five prune cultivars[J]. Xinjiang Agricultural Sciences，2013，50(9)：1626-1631.
[3] 宋开艳，何健，吐泥沙古丽·瓦斯里，乃比江·麦麦提，梁红蔚.喀什欧洲李产业优势及发展建议[J]. 新疆林业，2017(2)：30-32.SONG Kaiyan，HE Jian，Tunishaguli·Wasili，Naibijiang·Maimaiti，LIANG Hongwei. Kashi European plum industry advantages and development suggestions[J]. Forestry of Xinjiang，2017(2)：30-32.
[4] 张颖. 四个桃品种生物学特性及果实生长发育规律研究[D].长沙：中南林业科技大学，2021.ZHANG Ying. Study on biological characteristics and fruit growth and development of four peach varietiesby[D]. Changsha：Central South University of Forestry & Technology，2021.
[5] JAHED K R，HIRST P M. Fruit growth and development in apple：a molecular，genomics and epigenetics perspective[J]. Frontiers in Plant Science，2023，14：1122397.
[6] 易首全，李慧民. 喀什地区新梅发展历程[J]. 新疆农业科技，2022(2)：40-41.YI Shouquan，LI Huimin. Development history of Xinmei in Kashgar area[J]. Xinjiang Agricultural Science and Technology，2022(2)：40-41.
[7] 欧阳丽婷，耿文娟，冯贝贝，吕林杰，周媛. 新疆野生欧洲李种子形态及组织结构研究[J]. 中国农学通报，2017，33(32)：39-43.OUYANG Liting，GENG Wenjuan，FENG Beibei，LÜ Linjie，ZHOU Yuan. Morphology and structure of wild European plum seed in Xinjiang[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，2017，33(32)：39-43.
[8] 冯贝贝. 欧洲李生长发育生物学特性研究[D]. 乌鲁木齐：新疆农业大学，2017.FENG Beibei. Bionlogical characteristics of growth and development of Prunus domestica L.[D]. Urumqi：Xinjiang Agricultural University，2017.
[9] 赵树堂. 李果实发育过程中糖、酸、Vc 及矿质元素含量变化[D].保定：河北农业大学，2003.ZHAO Shutang. Changes in contents of sugar，acid，vitamin C and mineral element during fruit development of four plum cultivars[D]. Baoding：Hebei Agricultural University，2003.
[10] 杨建民. 李优良品种及实用栽培新技术[M]. 北京：中国农业出版社，2000.YANG Jianmin. Fine varieties of plum and new practical cultivation techniques[M]. Beijing：China Agriculture Press，2000.
[11] MOHAMMAD M，DING P. Physico-textural and cellular structure changes of Carissa congesta fruit during growth and development[J]. Scientia Horticulturae，2019，246：380-389.
[12] 王荣花，李嘉瑞，陈理论. 杏果实发育的形态解剖学研究[J].西北农业大学学报，2000，28(4)：45-50.WANG Ronghua，LI Jiarui，CHEN Lilun. Prelimiary studies on tissue structure and developmental anatomy of apricot during fruit growth and development[J]. The Journal of Northwest Agricultural University，2000，28(4)：45-50.
[13] 曹珂，王力荣，朱更瑞，方伟超，陈昌文，冯义彬. 桃不同类型果实发育的解剖结构特性[J]. 果树学报，2009，26(4)：440-444.CAO Ke，WANG Lirong，ZHU Gengrui，FANG Weichao，CHEN Changwen，FENG Yibin. Comparison of anatomical fruit structure in different types of peach during fruit development[J].Journal of Fruit Science，2009，26(4)：440-444.
[14] VIGNATI E，LIPSKA M，DUNWELL J M，CACCAMO M，SIMKIN A J. Fruit development in sweet cherry[J]. Plants，2022，11(12)：1531.
[15] 葛水莲，王有年，孟海玲，王一鸣，关伟，路苹. 桃果实发育解剖学与果核开裂研究[J]. 北京农学院学报，2006，21(4)：1-4.GE Shuilian，WANG Younian，MENG Hailing，WANG Yiming，GUAN Wei，LU Ping. Study on anatomy and pit-splitting during peach fruit development[J]. Journal of Beijing Agricultural College，2006，21(4)：1-4.
[16] 张珺，刘志民，马焕普，马少鹏. 桃果实维管束的分布及解剖研究[J]. 园艺学报，2009，36(5)：639-646.ZHANG Jun，LIU Zhimin，MA Huanpu，MA Shaopeng. Studies on anatomy and distribution of the vascular bundles in the peach fruit[J]. Acta Horticulturae Sinica，2009，36(5)：639-646.
[17] 刘庆华，王奎玲，张秀芬，周启河，刘庆芳. 甜樱桃果实发育解剖研究[J]. 莱阳农学院学报，1998，15(3)：184-187.LIU Qinghua，WANG Kuiling，ZHANG Xiufen，ZHOU Qihe，LIU Qingfang. The study of developmental anatomy on the fruit of Prunus salicina[J]. Journal of Laiyang Agricultural College，1998，15(3)：184-187.
[18] 魏雅君，廖康，李雯雯，冯贝贝，徐业勇，王明，杨红丽，牛莹莹.杏李花芽分化的组织解剖学研究[J]. 果树学报，2017，34(7)：843-850.WEI Yajun，LIAO Kang，LI Wenwen，FENG Beibei，XU Yeyong，WANG Ming，YANG Hongli，NIU Yingying. An anatomical study on flower bud differentiation in Prunus salicina ×armeniaca[J]. Journal of Fruit Science，2017，34(7)：843-850.
[19] 玉米提·玉素甫，王亚铜，杨芬芬，木扎帕尔·艾合麦提，耿文娟. 3 个欧洲李品种花芽形态分化比较[J/OL]. 分子植物育种，2023：1-14(2023-03-03)[2024-12-11]. https：//kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.S.20230303.1143.005.html.Yumiti·Yusufu，WANG Yatong，YANG Fenfen，Muzhapaer·Aihemaiti，GENG Wenjuan. Comparat-ive of flower bud morphological differentiation of three european plum cultivars[J/OL]. Molecular Plant Breeding，2023：1-14(2023-03-03)[2024-12-11]. https：//kns.cnki.net/kcms/detail/46.1068.S.20230303.1143.005.html.
[20] VANGDAL E，LUNDE KNUTSEN I，KVAMM-LICHTENFELD K. Fertilization and susceptibility to fruit cracking in plums (Prunus domestica L.) [J]. Acta Horticulturae，2018(1194)：25-30.
[21] LIU Y L，ZHANG P F，GENG Y P，XIE X D，WEN P F. Cracking of jujube fruits is associated with differential expression of metabolic genes[J]. FEBS Open Bio，2020，10(9)：1765-1773.
[22] PEREIRA S，SILVA V，BACELAR E，GUEDES F，SILVA A P，RIBEIRO C，GONÇALVES B. Cracking in sweet cherry cultivars early bigi and lapins：Correlation with quality attributes[J].Plants，2020，9(11)：1557.
[23] 张郎郎，张洁，吕虹霖，谭彬，王伟，程钧，冯建灿. 欧洲李叶片再生体系的建立[J]. 果树学报，2022，39(10)：1945-1953.ZHANG Langlang，ZHANG Jie，LÜ Honglin，TAN Bin，WANG Wei，CHENG Jun，FENG Jiancan. Establishment of leaf regeneration system for European plum[J]. Journal of Fruit Science，2022，39(10)：1945-1953.
[24] 刘旭. 成熟期不同的梨品种果实生长发育机理探讨[D]. 雅安：四川农业大学，2008.LIU Xu. Studies on mechanism of fruit growth and development of different ripening-season of pears[D]. Ya’an：Sichuan Agricultural University，2008.
[25] IONICA M E，NOUR V，TRANDAFIR I，COSMULESCU S，BOTU M H. Physical and chemical properties of some European plum cultivars (Prunus domestica L.)[J]. Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca，2013，41(2)：499.
[26] 李红光，刘俊灵，党美乐，杨惠娟，范献光，杨亚州，赵政阳. 苹果新品种‘瑞阳’及其亲本果实组织结构的比较分析[J]. 果树学报，2018，35(10)：1182-1189.LI Hongguang，LIU Junling，DANG Meile，YANG Huijuan，FAN Xianguang，YANG Yazhou，ZHAO Zhengyang. Comparative the anatomy of the fruit between a new apple cultivar‘Ruiyang’ and its parents[J]. Journal of Fruit Science，2018，35(10)：1182-1189.
[27] 张上隆，陈昆松. 果实品质形成与调控的分子生理[M]. 北京：中国农业出版社，2007.ZHANG Shanglong，CHEN Kunsong. Molecular physiology of fruit quality development and regulation[M]. Beijing：China Agriculture Press，2007.
[28] ZHANG Y P，SU Z W，LUO L J，WANG P K，ZHU X D，LIU J C，WANG C. Exogenous auxin regulates the growth and development of peach fruit at the expansion stage by mediating multiple-hormone signaling[J]. BMC Plant Biology，2023，23(1)：499.
[29] 冯军仁，田晓萍，钱万建，郭爱，李雪梅. 冷凉干旱地区欧洲李良种‘红西梅’果实生长发育规律与配方施肥研究[J]. 林业科技通讯，2018(11)：91-94.FENG Junren，TIAN Xiaoping，QIAN Wanjian，GUO Ai，LI Xuemei. Study on the growth and development regularity and formula fertilization of Pyrus domestica L. in cold and dry areas[J].Forest Science and Technology，2018(11)：91-94.
[30] 张宏平，张晋元，刘玉香，赵彦华，吴国良. 桃果实组织结构和超微结构细胞学研究[J]. 北方园艺，2018(1)：29-34.ZHANG Hongping，ZHANG Jinyuan，LIU Yuxiang，ZHAO Yanhua，WU Guoliang. Histological and ultrastructural cytology of peach fruit[J]. Northern Horticulture，2018(1)：29-34.
[31] BECKER T，KNOCHE M. Water movement through the surfaces of the grape berry and its stem[J]. American Journal of Enology and Viticulture，2011，62(3)：340-350.
[32] CLEARWATER M J，LUO Z W，ONG S E C，BLATTMANN P，THORP T G. Vascular functioning and the water balance of ripening kiwifruit (Actinidia chinensis) berries[J]. Journal of Experimental Botany，2012，63(5)：1835-1847.
[33] 谢兆森，杜鸿儒，项殿芳，齐永顺. 蓝莓果实不同发育期维管束解剖结构与水分运输变化[J]. 植物生理学报，2018，54(1)：45-53.XIE Zhaosen，DU Hongru，XIANG Dianfang，QI Yongshun. The changes of anatomical structure of vascular bundles and water transport in blueberry fruit during different growth and development stages[J]. Plant Physiology Journal，2018，54(1)：45-53.
[34] SANTOS M，EGEA-CORTINES M，GONÇALVES B，MATOS M. Molecular mechanisms involved in fruit cracking：A review[J]. Frontiers in Plant Science，2023，14：1130857.
[35] ZHANG M M，LIU Y T，CHEN Z，ZHI Z K，WANG A N，YUE H F，LI F D，ZHANG S L，ZHU G P. Progress in fruit cracking control of gibberellic acid and abscisic acid[J]. Forests，2024，15(3)：547.
[36] GRIMM E，HAHN J，PFLUGFELDER D，SCHMIDT M J，VAN DUSSCHOTEN D，KNOCHE M. Localized bursting of mesocarp cells triggers catastrophic fruit cracking[J]. Horticulture Research，2019，6：79.
[37] MU Q，HUANG Z J，CHAKRABARTI M，ILLA-BERENGUER E，LIU X X，WANG Y P，RAMOS A，VAN DER KNAAP E.Fruit weight is controlled by cell size regulator encoding a novel protein that is expressed in maturing tomato fruits[J]. PLoS Genetics，2017，13(8)：e1006930.
[38] ZHANG S W，WU S Q，JIA Z Q，ZHANG J H，LI Y，MA X Y，FAN B L，WANG P Q，GAO Y N，YE Z B，WANG W. Exploring the influence of a single-nucleotide mutation in EIN4 on tomato fruit firmness diversity through fruit pericarp microstructure[J]. Plant Biotechnology Journal，2024，22(9)：2379-2394.